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11楼2017-02-22 07:21:00
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huangts123

至尊木虫 (著名写手)

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8楼: Originally posted by superyeast at 2017-02-21 22:52:13
HPLC的柱子是什么型号的

Symmetry300 C4 5um 4.6*250mm
12楼2017-02-22 07:58:41
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

上LC-MASS确认一下吧,感觉像两个物质
快乐不需要走遍天涯去寻找,只需播一粒种子在脚下。
13楼2017-02-22 12:25:18
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

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5楼: Originally posted by huangts123 at 2017-02-21 17:30:35
1、如图中流动相所示,A:55%→40%; B:45%→60%;检查过没有放反; 2、如果样品浓度低,进样量大(10ul)会不会导致峰裂分; 3、样品为制剂液(主要为注射用水),怎样才能用流动相来溶(ps:用流动相稀释? 蛋白质在还 ...

A相和B相是你的流动相,我说的强洗和弱洗是指UPLC的两个灌洗液
样品浓度0.81mg/mL已经很高了啊,UPLC灵敏度也很高的
14楼2017-02-22 16:46:06
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huangts123

至尊木虫 (著名写手)

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14楼: Originally posted by llw1986 at 2017-02-22 16:46:06
A相和B相是你的流动相,我说的强洗和弱洗是指UPLC的两个灌洗液
样品浓度0.81mg/mL已经很高了啊,UPLC灵敏度也很高的...

您好,UPLC是借用别人的仪器(仪器上本来连有好多管子),我也是刚接触UPLC,只换了流动相,其他没有动过。请问灌洗液一般是什么溶剂?强洗和弱洗的管子上有什么标识?谢谢
15楼2017-02-22 18:08:13
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

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15楼: Originally posted by huangts123 at 2017-02-22 18:08:13
您好,UPLC是借用别人的仪器(仪器上本来连有好多管子),我也是刚接触UPLC,只换了流动相,其他没有动过。请问灌洗液一般是什么溶剂?强洗和弱洗的管子上有什么标识?谢谢...

我不知道你们的仪器强洗和弱洗用的什么,一般都是乙腈和水。管子上应该是S和W吧,具体我也忘记啦
16楼2017-02-23 17:12:00
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huangts123

至尊木虫 (著名写手)

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3楼: Originally posted by llw1986 at 2017-02-21 17:09:38
1. 你的强洗和弱洗用的什么?有没有放反了?
2. 如果怀疑过载了 这个是最好解决的,可以做几个稀释样品试一下就知道了,分别稀释10, 100, 1000等。直至不出现分叉
3. 溶剂效应的话可以用其实流动相组成来溶解样 ...

您好,如图所示,我通过减少进样量,稀释样品浓度,用流动相稀释样品,UPLC还是出双峰。好难过,难道是方法有问题?
同一蛋白在HPLC测的纯度>99%,而UPLC上出现峰裂分
UPLC.jpg

17楼2017-03-01 16:27:32
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

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17楼: Originally posted by huangts123 at 2017-03-01 16:27:32
您好,如图所示,我通过减少进样量,稀释样品浓度,用流动相稀释样品,UPLC还是出双峰。好难过,难道是方法有问题?

UPLC.jpg
...

这么看感觉应该是两个物质 你打个质谱看看
18楼2017-03-01 17:06:24
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huangts123

至尊木虫 (著名写手)

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18楼: Originally posted by llw1986 at 2017-03-01 17:06:24
这么看感觉应该是两个物质 你打个质谱看看...

这个是蛋白质,分子量是一个范围,和化药不一样啊
19楼2017-03-01 17:15:27
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

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19楼: Originally posted by huangts123 at 2017-03-01 17:15:27
这个是蛋白质,分子量是一个范围,和化药不一样啊...

这就尴尬了 光看你图忘记你做的是蛋白了,突然想起个问题 你UPLC和HPLC用的是同一根柱子吗?
20楼2017-03-01 17:25:47
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