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dailiang木虫 (正式写手)
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[交流]
关于凝胶阻滞(EMSA)中核蛋白与DNA探针结合条件优化的问题
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小弟最近受困于凝胶阻滞试验(EMSA),望各位大侠帮忙解决! 我是用核蛋白粗提液(全细胞裂解液)与启动子区域做结合,来研究启动子的,但是在试验中发现两者结合不理想,请问应该如何进行条件优化,才能得到较好结果? 下面是我的试验条件: 结合条件: 核蛋白粗提液(粗蛋白)量1-5ug,核酸量100ng,未加Poly(dI:dC),结合温度28,时间30分钟 电泳条件为: 5%PAGE,恒压120V,2小时 恳请各位大侠相助! [ Last edited by 350784478 on 2009-10-1 at 13:13 ] |
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