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bunntly

木虫 (正式写手)

[求助] x-Gal筛选双歧杆菌不显色求解 已有3人参与

最近做双歧杆菌筛选,样本为婴儿粪便,打算用x-Gal作为筛选剂,但是前期预实验发现x-Gal均不显色
操作为:样本稀释而后涂布于添加了终浓度60mg/L X-Gal的MRS平板,厌氧37度培养48h,但是没有发现
蓝色菌落,试了a 和β型的x-Gal均不行,用的DMF溶解的,现配现用的。
有没有有经验的人帮指明下是哪里操作的问题,还是什么,为什么x-Gal不显色。
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bunntly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 学霸我爱你 at 2017-03-22 20:24:18
楼主问题解决了吗?我现在遇到了和楼主一样的问题。。。

解决了  我们用厌氧盒培养的 发现在培养过程中打开厌氧盒让氧气进入,然后再密封上 培养48h后就出现蓝色菌落了,不知你是否解决了
9楼2017-06-02 16:56:52
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amidural

木虫 (正式写手)

2楼2017-02-17 20:10:56
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bunntly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by amidural at 2017-02-17 20:10:56
用的什么载体?

不是做的分子生物学 没有任何载体 双岐筛选用x-Gal筛选的原理是由于双歧杆菌具有半乳糖苷酶因而能分解X-Gal形成蓝色产物
3楼2017-02-23 13:36:39
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yuyuwuxin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小冀-: 应助指数+1 2017-02-24 21:26:06
1.首先要验证培养基,MRS上那些显色的大肠杆菌是否显色
2.你要确定你的双歧杆菌是有β半乳糖苷酶的。
4楼2017-02-23 14:22:07
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