24小时热门版块排行榜    

查看: 2087  |  回复: 8

bunntly

木虫 (正式写手)

[求助] x-Gal筛选双歧杆菌不显色求解 已有3人参与

最近做双歧杆菌筛选,样本为婴儿粪便,打算用x-Gal作为筛选剂,但是前期预实验发现x-Gal均不显色
操作为:样本稀释而后涂布于添加了终浓度60mg/L X-Gal的MRS平板,厌氧37度培养48h,但是没有发现
蓝色菌落,试了a 和β型的x-Gal均不行,用的DMF溶解的,现配现用的。
有没有有经验的人帮指明下是哪里操作的问题,还是什么,为什么x-Gal不显色。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amidural

木虫 (正式写手)

2楼2017-02-17 20:10:56
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bunntly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by amidural at 2017-02-17 20:10:56
用的什么载体?

不是做的分子生物学 没有任何载体 双岐筛选用x-Gal筛选的原理是由于双歧杆菌具有半乳糖苷酶因而能分解X-Gal形成蓝色产物
3楼2017-02-23 13:36:39
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuyuwuxin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小冀-: 应助指数+1 2017-02-24 21:26:06
1.首先要验证培养基,MRS上那些显色的大肠杆菌是否显色
2.你要确定你的双歧杆菌是有β半乳糖苷酶的。
4楼2017-02-23 14:22:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bunntly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuyuwuxin at 2017-02-23 14:22:07
1.首先要验证培养基,MRS上那些显色的大肠杆菌是否显色
2.你要确定你的双歧杆菌是有β半乳糖苷酶的。

培养基验证过MRS上大肠杆菌是能显色的,文献报道含有半乳糖苷酶。
我做的也不是不能显色而是和文献有所出入,文献是48h后拿出来就有蓝色
但是我的这个是48h培养后,在放到有氧环境4-8h后也有变蓝的菌落产生
5楼2017-02-23 15:27:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuyuwuxin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by bunntly at 2017-02-23 15:27:07
培养基验证过MRS上大肠杆菌是能显色的,文献报道含有半乳糖苷酶。
我做的也不是不能显色而是和文献有所出入,文献是48h后拿出来就有蓝色
但是我的这个是48h培养后,在放到有氧环境4-8h后也有变蓝的菌落产生...

那就是该方法不适合在厌氧环境中筛选双歧杆菌,双歧杆菌对四环素自然耐药,你可以用四环素筛选啊
6楼2017-02-27 08:12:49
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

加IPTG或乳糖诱导
7楼2017-02-27 19:23:10
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学霸我爱你

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主问题解决了吗?我现在遇到了和楼主一样的问题。。。
8楼2017-03-22 20:24:18
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bunntly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 学霸我爱你 at 2017-03-22 20:24:18
楼主问题解决了吗?我现在遇到了和楼主一样的问题。。。

解决了  我们用厌氧盒培养的 发现在培养过程中打开厌氧盒让氧气进入,然后再密封上 培养48h后就出现蓝色菌落了,不知你是否解决了
9楼2017-06-02 16:56:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bunntly 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +4 vv迷 2026-03-22 4/200 2026-03-22 23:29 by king123!
[考研] 298求调剂 +6 上岸6666@ 2026-03-20 6/300 2026-03-22 20:21 by edmund7
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +3 niko- 2026-03-22 3/150 2026-03-22 15:15 by 杨杨杨紫
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:04 by 搏击518
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考! +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
信息提示
请填处理意见