24小时热门版块排行榜    

查看: 2088  |  回复: 8

bunntly

木虫 (正式写手)

[求助] x-Gal筛选双歧杆菌不显色求解 已有3人参与

最近做双歧杆菌筛选,样本为婴儿粪便,打算用x-Gal作为筛选剂,但是前期预实验发现x-Gal均不显色
操作为:样本稀释而后涂布于添加了终浓度60mg/L X-Gal的MRS平板,厌氧37度培养48h,但是没有发现
蓝色菌落,试了a 和β型的x-Gal均不行,用的DMF溶解的,现配现用的。
有没有有经验的人帮指明下是哪里操作的问题,还是什么,为什么x-Gal不显色。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amidural

木虫 (正式写手)

2楼2017-02-17 20:10:56
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bunntly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by amidural at 2017-02-17 20:10:56
用的什么载体?

不是做的分子生物学 没有任何载体 双岐筛选用x-Gal筛选的原理是由于双歧杆菌具有半乳糖苷酶因而能分解X-Gal形成蓝色产物
3楼2017-02-23 13:36:39
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuyuwuxin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小冀-: 应助指数+1 2017-02-24 21:26:06
1.首先要验证培养基,MRS上那些显色的大肠杆菌是否显色
2.你要确定你的双歧杆菌是有β半乳糖苷酶的。
4楼2017-02-23 14:22:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bunntly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuyuwuxin at 2017-02-23 14:22:07
1.首先要验证培养基,MRS上那些显色的大肠杆菌是否显色
2.你要确定你的双歧杆菌是有β半乳糖苷酶的。

培养基验证过MRS上大肠杆菌是能显色的,文献报道含有半乳糖苷酶。
我做的也不是不能显色而是和文献有所出入,文献是48h后拿出来就有蓝色
但是我的这个是48h培养后,在放到有氧环境4-8h后也有变蓝的菌落产生
5楼2017-02-23 15:27:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuyuwuxin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by bunntly at 2017-02-23 15:27:07
培养基验证过MRS上大肠杆菌是能显色的,文献报道含有半乳糖苷酶。
我做的也不是不能显色而是和文献有所出入,文献是48h后拿出来就有蓝色
但是我的这个是48h培养后,在放到有氧环境4-8h后也有变蓝的菌落产生...

那就是该方法不适合在厌氧环境中筛选双歧杆菌,双歧杆菌对四环素自然耐药,你可以用四环素筛选啊
6楼2017-02-27 08:12:49
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

加IPTG或乳糖诱导
7楼2017-02-27 19:23:10
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学霸我爱你

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主问题解决了吗?我现在遇到了和楼主一样的问题。。。
8楼2017-03-22 20:24:18
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bunntly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 学霸我爱你 at 2017-03-22 20:24:18
楼主问题解决了吗?我现在遇到了和楼主一样的问题。。。

解决了  我们用厌氧盒培养的 发现在培养过程中打开厌氧盒让氧气进入,然后再密封上 培养48h后就出现蓝色菌落了,不知你是否解决了
9楼2017-06-02 16:56:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bunntly 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 306求调剂 +6 chuanzhu川烛 2026-03-18 6/300 2026-03-22 19:39 by 公瑾逍遥
[考研] 环境学硕288求调剂 +6 皮皮皮123456 2026-03-22 6/300 2026-03-22 16:52 by i_cooler
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 346求调剂[0856] +4 WayneLim327 2026-03-16 7/350 2026-03-21 04:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 281求调剂(0805) +14 烟汐忆海 2026-03-16 25/1250 2026-03-20 15:47 by yuncha
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
信息提示
请填处理意见