24小时热门版块排行榜    

查看: 2388  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

清嗓金声

铜虫 (初入文坛)


已领完
重组载体构建问题,载体双酶切老切不开。
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫,下载小木虫客户端

本人构建重组载体,两个酶切位点之间有8bp,有共用buffer可以一块切,一块切过夜,两个酶分开切过夜都试过,液体回收回来跑胶,和未切的质粒做对照,双酶切的明显跑得慢。这个可以说明载体切开了吗?和我的目的片段重组总是假阳性多,平板长满克隆。载体和片段比例问题也按照说明算过加的。之前菌落鉴定过也确实没条带。求助各位大神!!眼看植物一天天长大要侵染了。

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seascen2016

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
还有你片段很载体分别多大,可以把片段多加一些。酶切2-个小时就足够了,有时候过夜酶切容易产生星号活性,反而不好

发自小木虫Android客户端
8楼2017-02-14 16:09:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

a509893600

铜虫 (小有名气)


5楼2017-02-14 11:25:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star013

新虫 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们公司可以提供载体构建技术服务

发自小木虫Android客户端
6楼2017-02-14 13:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seascen2016

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用的是什么酶,有的酶酶切需要保护碱基的,要先切。

发自小木虫Android客户端
7楼2017-02-14 16:07:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
郭帅楠2楼
2017-02-14 11:25   回复  
清嗓金声(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
uonh4楼
2017-02-14 11:25   回复  
清嗓金声(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫IOS客户端
酒进鹤3楼
2017-02-14 11:25   回复  
清嗓金声(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫IOS客户端
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 17:31 by 4FFAWE8HcgUD
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 17:30 by 4FFAWE8HcgUD
[基金申请] 面上意见出来了 +6 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 12/600 2026-08-29 17:20 by 黄鸟于飞Chao
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 13:51 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +14 晴天加油 2026-08-26 15/750 2026-08-29 11:06 by biily
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见