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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 急求！！小鼠血清micRNA逆转录及Real-time PCR的好方法
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是牛头or凤尾

新虫 (初入文坛)

[求助] 急求！！小鼠血清micRNA逆转录及Real-time PCR的好方法

我做的是血清micRNA，做两种micRNA，在用TRIzol LS 提取过总RNA后用颈环引物反转录及荧光定量，由于血清总RNA提取后总是浓度不高，这种特异性引物法在逆转录时将会耗费很多样而最终荧光定量又不是很理想。

现请问，是否是我提取总RNA这步效率较低导致特异性引物法不好用？还是其他原因导致的呢？

        另，是不是通用引物法在血清micRNA检测中会相对好使一些且更省材料？有什么通用引物能很好的用于血清micRNA的逆转录，在通用逆转录法下用什么方法法进行定量较好?
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1楼 2017-02-14 09:32:26
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)
个人觉得，高质高量的total rna是关键。你可以提纯几个样，再purify一下

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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2017-02-15 20:10:46
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是牛头or凤尾

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by drwhoknowss at 2017-02-15 20:10:46
个人觉得，高质高量的total rna是关键。你可以提纯几个样，再purify一下

也就是说引物等的影响不是很大吗？提纯有什么好方法呢？

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3楼2017-02-16 10:55:01
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