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971731043

新虫 (职业作家)

[求助] 蛋白超滤过程中出现沉淀 已有2人参与

镍柱纯化后的蛋白,在超滤时发生沉淀,用的是20mm的磷酸buffer,含有50mm的氯化钠,将氯化钠提高到300mm时,沉淀更严重了,无氯化钠的buffer时,也有沉淀,该怎么做才能消除沉淀啊?谢谢!

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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
超滤时产生沉淀  很可能是蛋白浓度过大
如果超滤的目的是换液  建议增大一点体积
2楼2017-02-08 15:52:45
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503276866

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白出现沉淀一方面可能由于浓度过高,适当的增加蛋白溶液的体积就可以,还有一种可能就是buffer的温度过低,可以在适当范围内提高buffer的温度
没有最好只有更好
3楼2017-02-08 20:00:28
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

4楼2017-02-08 20:35:38
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alicelchf

木虫 (著名写手)

试试透析?并降低蛋白浓度。

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修身、齐家、治国、平天下
5楼2017-02-08 20:45:17
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971731043

新虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by alicelchf at 2017-02-08 20:45:17
试试透析?并降低蛋白浓度。

我要测酶活,不能降低浓度,

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6楼2017-02-08 20:53:23
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971731043

新虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by stevenshi021 at 2017-02-08 20:35:38
重点看看ph与盐浓度

ph7.2,蛋白pi5.8这可以吧

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7楼2017-02-08 20:54:15
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

8楼2017-02-08 22:02:10
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971731043

新虫 (职业作家)

引用回帖:
8楼: Originally posted by stevenshi021 at 2017-02-08 22:02:10
那看看盐吧

先用50mm氯化钠沉淀,后升高到300mm还是

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9楼2017-02-08 22:09:50
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

能加点甘油蔗糖之类的东西

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10楼2017-02-08 22:10:41
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