24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1202  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

观享世界

木虫 (小有名气)

[求助] 比较着急的问题,关于基因敲除的,请大神解答 已有3人参与

附件是载体图谱,图谱中仅有两个酶切位点,分别是EcoRI和AgeI,我就是用双酶切后然后在这两个位点间插入shRNA,之后就是常规的步骤涂板挑单克隆啥的,最后做出来测序也没问题。
但是到病毒包装感染细胞后筛选就出问题了:图谱中可以看到,该载体含有puro抗性序列,我用puro筛选感染后的细胞,细胞无法存活,重复了很多遍,也让不同的人重复这一步,结果都一样。
请问大神们,到底哪里出问题了?

比较着急的问题,关于基因敲除的,请大神解答
图片1.png@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
回复此楼
书写人生
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
5楼2017-02-01 21:39:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2017-02-01 22:36:40
莫非没有感染成功?感染效率怎么样啊。
2楼2017-02-01 16:10:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
3楼2017-02-01 16:22:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kangaroo0513

新虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2017-02-01 22:36:53
听起来是病毒包装不成功。。。
4楼2017-02-01 21:09:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 药学专硕调剂 +9 ? 一路生?花? 2026-04-10 11/550 2026-04-16 10:49 by noqvsozv
[考研] 290调剂生物0860 +38 哇哈哈,。 2026-04-11 44/2200 2026-04-16 09:52 by cuisz
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +4 白云123456789 2026-04-13 4/200 2026-04-16 00:18 by 粉沁若尘
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 54/2700 2026-04-14 18:00 by lhj2009
[考研] 人工智能320调剂08工类还有机会吗 +18 振—TZ 2026-04-10 19/950 2026-04-14 10:34 by screening
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +24 好好休息好不好 2026-04-09 27/1350 2026-04-13 22:22 by pies112
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] 考研二轮调剂 +10 故人?? 2026-04-09 10/500 2026-04-13 09:55 by szhize
[考研] +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 电气工程专硕320求调剂 +5 小麻子111 2026-04-10 5/250 2026-04-12 10:47 by zhouyuwinner
[考研] 085410 273求调剂 +10 X1999 2026-04-09 10/500 2026-04-12 09:24 by 逆水乘风
[考研] 材料与化工300求调剂 +39 肖开文 2026-04-09 43/2150 2026-04-12 01:30 by 秋豆菜芽
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 一志愿京区985,085401,与本科专业一致,电子信息工程, +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[考研] 初试261 +3 Asht少 2026-04-10 6/300 2026-04-10 16:38 by Asht少
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
信息提示
请填处理意见