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[交流]
求教：关于植化的粗分，高手帮忙解答，谢过
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我做一种花的植化部分，刚刚上任手生，就是系统萃取完之后，石油醚和乙酸乙酯部分的粗分该怎样进行？我看好多资料都是先梯度洗脱， 1.梯度洗脱怎样选系统？ 2.如果上硅胶柱进行粗分怎样确定梯度洗脱的比例变化范围？ 3.分几个梯度比较好？ 4.每个梯度用淋洗剂的量怎样确定？ 请各位高手逐一解答（务必都解答）。本虫在此谢过。金币不多，不成敬意。大家可以继续发言讨论，就算是帮众多提取分离新手解惑吧。 |
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clkk216(金币+1,VIP+0):辛苦了~！ 谢谢 ~！
yuanshao(金币+3,VIP+0):谢谢答复，还有问题请指教
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我就自己的体会和你交流下吧。 1.一般来说，四个萃取部位中以乙酸乙酯最好分，因为里面多为中等极性化合物，所用洗脱系统比较典型，而且洗脱出来的化合物也比较容易结晶出来。所以一般先分乙酸乙酯部位。常的就是氯仿-丙酮、氯仿-甲醇或者氯仿-丙酮-甲醇系统。原则就是看你选的系统从100：1开始洗，最上面的点能跑到什么位置，最好RF在0.1左右。最后到1：1左右时最后的点能不能推出去。石油醚系统比较难分，一般用到环已烷-苯等毒性比较大。 2.比例一般来说也是程序的，我们实验室常用的，100：1，100：2，100：5，9：1，85：15，8：2，7：3，1：1等。注意刚开始的梯度变化要小，以后逐渐增大。虽然是粗分，粗分分得好，合并得当的话，一个柱子冲下几个化合物来也是很常见的。 3.梯度选用就如上所说的了。当然这个也不是绝对化的。 4.一般每个洗脱剂用4-6柱体积，当然也要结合TLC来定，如果有一大量的东西在下的话，就不要急于换梯度。柱体积是指的材料的空隙体积，一般用所用硅胶量乘以0.23左右。 以上仅是个人经验之谈，希望对你有所帮助。 |
2楼2008-12-15 16:08:50
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