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南宫启

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教:发酵的脱脂乳中菌体提取 已有1人参与

将保加利亚乳杆菌接入脱脂乳中,恒温发酵,想在4 h、8 h分别提取菌体,做qRT-PCR。

用了两种方法离心,都没有离心下来,请问有没有人遇到过这种情况,是怎么解决的。

1. 4度,10000xg,5min,重悬。但没有离心出上清

2. 4度,200xg,10min;然后用4度,12000xg,5min,但是第一步离心就没有离心出上清。

先谢谢大家了!

原先的号没了,刚注册的新号悬赏只能这么多了。
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林志遥-14

木虫 (正式写手)


话说,楼主的脱脂乳是自己制备的吗?怎么制得的呢?
3楼2017-11-25 10:27:42
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huangjixiang

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

乳中含有大量酪蛋白,离心会一起沉淀的。可以考虑在发酵后的乳中,加入一些edta和NaOH,具体浓度忘记了,也不用太高,pH为弱碱性,可以将酪蛋白溶解为溶液,离心可收集菌体。
2楼2017-02-02 15:13:20
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