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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 专业交流 » 支架上细胞实验
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luo0622

新虫 (小有名气)

[求助] 支架上细胞实验 已有3人参与

用冷冻干燥做的多孔支架，养成骨细胞，接种细胞后拍扫描电镜看不到细胞，CCK8实验测OD值第三天相比第一天的有增加，这是怎么回事呢？求大神指导。
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1楼 2017-01-18 21:23:39
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123静梓

金虫 (小有名气)
不知道，帮你顶一下

发自小木虫IOS客户端
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2楼2017-02-24 13:18:42
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匿名

用户注销 (初入文坛)
★
markar: 金币+1, 感谢交流！ 2017-04-01 07:39:46
本帖仅楼主可见
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3楼2017-02-25 22:21:40
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ztt_april

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Wheatsun at 2017-02-25 22:21:40
你做的是胶原基材料吗？我的材料不知道什么原因1，3，5，7天数的时候，几乎OD值都是一样的，找不出什么原因。都为0.1左右。我在显微镜下也看不到细胞，到扫描电镜下还没有看。MTT实验都做不出来，真是急死人了，这个 ...

我的也是，急死人了
确定细胞没有染菌
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4楼2017-03-14 21:05:26
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luo0622

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Wheatsun at 2017-02-25 22:21:40
你做的是胶原基材料吗？我的材料不知道什么原因1，3，5，7天数的时候，几乎OD值都是一样的，找不出什么原因。都为0.1左右。我在显微镜下也看不到细胞，到扫描电镜下还没有看。MTT实验都做不出来，真是急死人了，这个 ...

显微镜下应该看不到细胞吧，胶原材料不透光，做SEM看一下有没有
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5楼2017-03-28 09:46:13
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许为中-4759

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感觉是灭菌没搞好，我之前也这样，后面长到10d，染色共聚焦看，密密麻麻全是的
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6楼2017-03-30 22:02:08
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drwant

新虫 (初入文坛)
同一个培养皿里面，不但材料上种细胞，在皿里也种一些，作为每天光镜下观察的指标，明确自己培养细胞有没有问题

发自小木虫IOS客户端
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7楼2017-04-01 00:21:26
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ai_xinke

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.如果你的细胞确实增长了，那就是制样的问题。制样过程很重要，如果制样不合适，细胞会在支架上掉下来。制样方法与材料的属性有关。几个注意点：
       1）制样过程：乙醇梯度脱水后，采用二氧化碳临界干燥法来制备样品。
       2）支架的正反面也是有区别的，如果你的支架比较厚，细胞可能处于上表面，如果你扫描电镜观察的是下表面，那自然是没有细胞的

2.你的细胞并没有增殖。

祝好运！
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与人玫瑰，手有余香
8楼2017-04-01 10:52:49
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