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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 求助如何测细胞在支架上和水凝胶的增殖和粘附！！急求
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fistwl

新虫 (小有名气)

[求助] 求助如何测细胞在支架上和水凝胶的增殖和粘附！！急求

新手求助！

我看过好多文章中，做支架的细胞粘附实验，首先是先做成膜，再在膜上测细胞粘附和增殖，但是如果支架做不成膜，非得要在支架上测细胞的粘附和增殖呢？还用MTT呢还是？

水凝胶同求，如果是戊二醛做交联剂的水凝胶，就不能先在交联之前混入细胞，难道要在水凝胶成胶后在表面测吗？

如果能扔几篇文献来就更好啦~

小女子先行谢过各位大侠~
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1楼 2012-12-15 22:39:02
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 晚香玉 at 2012-12-17 11:16:52
试剂盒上直接有说明的，不用专门的去裂解细胞...

试剂盒上说的是提取DNA，提取DNA肯定需要破裂细胞的~
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渴望旅游
14楼2012-12-17 12:23:19
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红舟流星

荣誉版主 (文坛精英)

志在成为千元户！

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fool_proof: 金币+1, 欢迎来到生物材料板块应助交流~ 2012-12-16 08:58:59
fistwl: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-16 21:22:30
MTT是浸润液的毒性，不是证明细胞贴附生长与否，只能证明这个东西浸润液毒性~
去扫电镜吧~
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红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
2楼2012-12-16 00:03:44
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fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2012-12-16 11:00:25
不管是支架还是凝胶都可以切片后采用荧光染色的方法观察细胞在材料内部的分布情况，增殖情况可以将细胞消解释放出DNA，检测DNA的变化情况。贴附可以通过扫描电镜观察。
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渴望旅游
3楼2012-12-16 08:30:24
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fistwl

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fool_proof at 2012-12-16 08:30:24
不管是支架还是凝胶都可以切片后采用荧光染色的方法观察细胞在材料内部的分布情况，增殖情况可以将细胞消解释放出DNA，检测DNA的变化情况。贴附可以通过扫描电镜观察。

谢谢~
请问如何消解细胞，需要将支架一起消解吗？

对于戊二醛做交联剂的水凝胶如果想种细胞，就只能种在表面吗？
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4楼2012-12-16 09:46:58
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fistwl

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 红舟流星 at 2012-12-16 00:03:44
MTT是浸润液的毒性，不是证明细胞贴附生长与否，只能证明这个东西浸润液毒性~
去扫电镜吧~

那水凝胶的如何？只能种在表面吗？
能测DNA含量吗？
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5楼2012-12-16 09:48:04
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晚香玉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2012-12-16 11:00:48
Picgreen 测DNA含量就行了
MTT不准
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6楼2012-12-16 10:13:04
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fistwl

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 晚香玉 at 2012-12-16 10:13:04
Picgreen 测DNA含量就行了
MTT不准

搜不出来。。。。。
picgreen是可以用来测支架上的细胞的增殖吗？
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7楼2012-12-16 10:53:16
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晚香玉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
黄酮: 金币+1, 欢迎来生物材料交流学习 2012-12-16 13:48:28
引用回帖:
7楼: Originally posted by fistwl at 2012-12-16 10:53:16
搜不出来。。。。。
picgreen是可以用来测支架上的细胞的增殖吗？...

PicoGreen assay    Invitrogen, Inc.
膜和支架都可以，是裂解细胞然后测DNA的含量
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8楼2012-12-16 12:58:41
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fistwl

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 晚香玉 at 2012-12-16 12:58:41
PicoGreen assay    Invitrogen, Inc.
膜和支架都可以，是裂解细胞然后测DNA的含量...

谢谢~

那如何裂解细胞？

新手求指导~~万分感谢
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9楼2012-12-16 19:30:03
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fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by fistwl at 2012-12-16 19:30:03
谢谢~

那如何裂解细胞？

新手求指导~~万分感谢...

一般都是用蛋白酶K裂解细胞的，如果是蛋白质材料支架，也会被降解掉~
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渴望旅游
10楼2012-12-16 21:26:02
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