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燕子sy

银虫 (小有名气)

[求助] 求助,蛋白电泳跑胶的问题已有4人参与

本人近期在跑胶(sds-page),以前从没做过,那胶跑得实在是不忍直视啊,大神们帮忙看看都有些什么问题,如何改进,我知道有很多问题,求吐槽,谢谢!
实验结果见下图,很明显的几个问题,一、空白的那组条带,整条都很蓝,都看不清条带了;二、加样组有很多竖着的条带;三、想让条带再往下跑跑。

求助,蛋白电泳跑胶的问题
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求助,蛋白电泳跑胶的问题-1
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我比小强还小强,越挫越勇!
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free马丁

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
燕子sy: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢你的回复,最近还未开始重做。 2017-03-06 09:10:17
1.Marker是哪家的?跑成这样肯定是配胶有问题。配胶要耐心,给足凝固时间。
2.确定配胶没问题的话,请问分离胶浓度多少?根据你的情况可适当的降低浓度,或者延长电泳时间,可增加空白组条带分离度。
3.关于上样量,空白组肯定是多了,要适当降低。实验组上样量低。因为你测的是总蛋白浓度,并不准确,这个数值只能作为参考。
4.脱色时间再长点,可以去除蓝色背景,得到的胶基本上是透明无色的。
21楼2017-02-16 13:42:12
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
燕子sy(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2017-01-22 18:31:31
说明你的蛋白酶效果很好,蛋白质都基本被降解了
2楼2017-01-18 10:22:28
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燕子sy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-01-18 10:22:28
说明你的蛋白酶效果很好,蛋白质都基本被降解了

哈哈,效果是毋庸置疑的,就是为加酶组有很多乱七八糟也看不明的条带,还有我那空白对照为什么那样,底色那么蓝?您知道吗?
我比小强还小强,越挫越勇!
3楼2017-01-18 10:56:39
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 燕子sy at 2017-01-18 10:56:39
哈哈,效果是毋庸置疑的,就是为加酶组有很多乱七八糟也看不明的条带,还有我那空白对照为什么那样,底色那么蓝?您知道吗?...

蓝色是蛋白
4楼2017-01-18 11:25:22
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