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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 还是老问题，提取质粒浓度极低而且有杂质，怎么办？
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)

[求助] 还是老问题，提取质粒浓度极低而且有杂质，怎么办？ 已有1人参与

这个问题一起问过，一直没改善。用试剂盒提取的，QIAGEN QIAprep  Spin Miniprep Kit(250)。细胞是大肠杆菌E Coli.。求问怎么办？

还是老问题，提取质粒浓度极低而且有杂质，怎么办？
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还是老问题，提取质粒浓度极低而且有杂质，怎么办？-1
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1楼 2017-01-15 14:01:12
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

东哥殿下

新虫 (小有名气)
你这浓度太低了，我用试剂盒抽，浓浓度都是一百多的。我最近抽了30份质粒。

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12楼2017-01-15 15:51:50
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东哥殿下

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 钱塘幼麟 at 2017-01-15 16:44:55
QIAGEN QIAprep  Spin Miniprep Kit(250)...

没有听说过，我们实验室要么是天根，要么是全式金。一般都用小提，50次的。一百多一点。测浓度用核酸蛋白仪。不过误差在百分之三。

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16楼2017-01-15 16:47:21
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普通回帖

钱塘幼麟

木虫 (著名写手)
下图是我离心前的菌液。一共离心了4ml菌液用来提取质粒。
还是老问题，提取质粒浓度极低而且有杂质，怎么办？-2
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2楼2017-01-15 14:04:56
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hnnydx

木虫 (著名写手)
摇菌多长时间

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3楼2017-01-15 14:41:58
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疯狂ing

新虫 (初入文坛)
比值还好，我觉得是不是摇菌时间

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4楼2017-01-15 14:53:44
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激荡风雷

至尊木虫 (文坛精英)
是不是菌体没有裂解彻底啊？

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激荡风雷
5楼2017-01-15 14:54:09
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hnnydx at 2017-01-15 14:41:58
摇菌多长时间

37度220转摇床22小时。
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6楼2017-01-15 15:00:02
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hnnydx

木虫 (著名写手)
可以

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7楼2017-01-15 15:00:41
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 激荡风雷 at 2017-01-15 14:54:09
是不是菌体没有裂解彻底啊？

我觉得不像。
加了P1液，用移液器吹散菌团。加了P2后，出现大量蓝色小颗粒，而后翻转EP管5次左右。
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8楼2017-01-15 15:02:13
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hnnydx at 2017-01-15 14:41:58
摇菌多长时间

37度220转摇床22小时。
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9楼2017-01-15 15:04:23
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sunqx

木虫 (著名写手)
你菌有问题

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10楼2017-01-15 15:15:00
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