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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 还是老问题，提取质粒浓度极低而且有杂质，怎么办？
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by sunqx at 2017-01-15 15:15:00
你菌有问题

前几天跟师姐一起提过，她也是用和我一样的菌和一样的试剂盒。而且，她的曲线没我的这样不规则。
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11楼2017-01-15 15:19:01
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东哥殿下

新虫 (小有名气)
你这浓度太低了，我用试剂盒抽，浓浓度都是一百多的。我最近抽了30份质粒。

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12楼2017-01-15 15:51:50
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 东哥殿下 at 2017-01-15 15:51:50
你这浓度太低了，我用试剂盒抽，浓浓度都是一百多的。我最近抽了30份质粒。

分享一下经验吧？
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13楼2017-01-15 16:25:53
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东哥殿下

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 钱塘幼麟 at 2017-01-15 16:25:53
分享一下经验吧？...

我用质粒抽提试剂盒，全式金的。你用的是什么？

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14楼2017-01-15 16:42:23
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 东哥殿下 at 2017-01-15 16:42:23
我用质粒抽提试剂盒，全式金的。你用的是什么？
...

QIAGEN QIAprep  Spin Miniprep Kit(250)
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15楼2017-01-15 16:44:55
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东哥殿下

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 钱塘幼麟 at 2017-01-15 16:44:55
QIAGEN QIAprep  Spin Miniprep Kit(250)...

没有听说过，我们实验室要么是天根，要么是全式金。一般都用小提，50次的。一百多一点。测浓度用核酸蛋白仪。不过误差在百分之三。

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16楼2017-01-15 16:47:21
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东哥殿下

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 钱塘幼麟 at 2017-01-15 15:19:01
前几天跟师姐一起提过，她也是用和我一样的菌和一样的试剂盒。而且，她的曲线没我的这样不规则。...

建议你从新摇菌，摇5ml,换个人用相同的抽提一下试试。这样可以排除个人操作问题。

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17楼2017-01-15 17:12:59
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 东哥殿下 at 2017-01-15 17:12:59
建议你从新摇菌，摇5ml,换个人用相同的抽提一下试试。这样可以排除个人操作问题。
...

只能这样了。以前也让师姐这样跟我重做了一次，她提出来有300多，我还是几十。
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18楼2017-01-15 18:32:11
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baichi121234

禁虫 (职业作家)
本帖内容被屏蔽
19楼2017-01-15 18:49:59
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
37度22小时，时间太长了！！12-16小时正好，第一步p1，完全重悬，可用涡旋仪，第二步裂解，轻轻上下混匀离心管，不要用力！在静止2分钟，再加p3，除了加p1以外。其他所有步骤混匀都要轻轻的。qiagen很好的牌子。正常浓度200-500没问题，

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20楼2017-01-15 19:23:06
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