应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 蛋白变性复性
81/1返回列表
查看: 3721  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qinjuan

新虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白变性复性 已有3人参与

蛋白出现在沉淀中，想要通过urea,guanidine 重折叠，总是失败，求助各位大神（ ＴДＴ）

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-01-14 10:05:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王世玉

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
最近也在做原核表达，不顺利。。
赞一下 回复此楼
2楼2017-01-14 11:10:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinjuan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王世玉 at 2017-01-14 11:10:31
最近也在做原核表达，不顺利。。

你具体是做什么的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-02-01 12:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

X小天T

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-02-01 22:37:14
尿素浓度梯度复性，梯度小一点，另可以加入适量甘油（1%或者0.5）或者甘氨酸，要是再不行，就原核表达的时候低温诱导表达（原因参考包涵体的形成）。蛋白复性是个复杂的过程如果还是不行就考虑表达的时候加分子伴侣或者放弃这个蛋白。个人建议，祝顺利！

发自小木虫Android客户端
赞一下(3人) 回复此楼
4楼2017-02-01 18:58:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinjuan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by X小天T at 2017-02-01 18:58:42
尿素浓度梯度复性，梯度小一点，另可以加入适量甘油（1%或者0.5）或者甘氨酸，要是再不行，就原核表达的时候低温诱导表达（原因参考包涵体的形成）。蛋白复性是个复杂的过程如果还是不行就考虑表达的时候加分子伴侣 ...

谢谢你。我换了一种感受态低温诱导，可溶部分明显增加，但是过完第一根镍柱就不见了，图谱可以看到峰，但SDS胶上没条带，不知道怎么回事。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2017-02-27 16:48:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木子Jimmy

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by X小天T at 2017-02-01 18:58:42
尿素浓度梯度复性，梯度小一点，另可以加入适量甘油（1%或者0.5）或者甘氨酸，要是再不行，就原核表达的时候低温诱导表达（原因参考包涵体的形成）。蛋白复性是个复杂的过程如果还是不行就考虑表达的时候加分子伴侣 ...

我采用的是梯度复性，蛋白没有出现沉淀，但是作为结构蛋白（外膜蛋白），如何考察复性率呢？蛋白含有二硫键，怎么确定复性成功？
赞一下 回复此楼
6楼2017-02-27 17:18:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

X小天T

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by qinjuan at 2017-02-27 16:48:15
谢谢你。我换了一种感受态低温诱导，可溶部分明显增加，但是过完第一根镍柱就不见了，图谱可以看到峰，但SDS胶上没条带，不知道怎么回事。
...

能确认就是你的目的蛋白峰吗？沉淀有没有一块跑胶检测？过镍柱时洗脱浓度有没有摸索？或者你把过镍柱后的蛋白液浓缩一下再跑胶看看

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-02-27 22:29:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

X小天T

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 木子Jimmy at 2017-02-27 17:18:54
我采用的是梯度复性，蛋白没有出现沉淀，但是作为结构蛋白（外膜蛋白），如何考察复性率呢？蛋白含有二硫键，怎么确定复性成功？...

https://baike.1688.com/doc/view-d29522542.html 参考这个看一下，希望对你有帮助。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-02-27 22:35:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qinjuan 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:33 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:24 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:25 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:57 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:45 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
[基金申请] 面上有专家说实验设备不是我们单位的 +6 zj_muchong 2026-09-08 8/400 2026-09-11 06:56 by suifengdao
[有机交流] 科研求助 10+4 我吃一只鱼 2026-09-07 4/200 2026-09-10 08:32 by 0940628
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭