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guishuai_tj铁虫 (著名写手)
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pcr空白对照老是出现两条带，怎么回事？ 已有6人参与
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最下面的一条应该是引物二聚体，那上面的那条呢？都是小于100bp的，做了好多次经常是这样的结果，也有时候只出现最下面的那条引物二聚体条带 发自小木虫IOS客户端 |
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你提的DNA 电泳图怎么样？小分子条带多吗？？可以给模板跑个电泳，看看浓度是不是太大，稀释一下再做PCR 发自小木虫IOS客户端 |
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guishuai_tj3楼2017-01-11 09:54:26
小冀-
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7楼2017-01-11 12:51:44
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猪肝浸膏，猪肝提取液，是经过加工的，核酸应该被破坏比较严重，大部分断裂了，我用试剂盒提取的，刚开始提取的没有任何条带，改了一些步骤才提取出这么点很小的条带 发自小木虫IOS客户端 |
12楼2017-01-11 14:49:11
【答案】应助回帖
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| 非特异扩增吧。如果条带大小跟目的条带差距很大，不用理吧，请示下老板，别投进太多精力。 |
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19楼2017-01-13 16:12:24
guishuai_tj
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2楼2017-01-11 09:53:21
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这是我提取的dna的电泳图，用试剂盒提取的，都是小于100的片段，但是我用它做pcr也p出过两次100多的目的片段，说明含有100以上的，只是含量比较少，后来再p的时候不知道怎么回事就p不出来了。现在遇到俩问题一个是目的片段老是出不来，另一个就是老是p出图上的那个引物二聚体上面的亮条带  发自小木虫IOS客户端 |
4楼2017-01-11 10:54:20
guishuai_tj
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5楼2017-01-11 10:54:39
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guishuai_tj
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8楼2017-01-11 12:53:20
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9楼2017-01-11 12:56:48
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1。空白对照出现条带应该是出现了污染，污染可能来自体系中也可能来自外界，建议停一下试验，好好打扫卫生 2。曾经p出过100+的片段说明引物特异性不是最优，可尝试提高Tm，实在不行做个梯度 发自小木虫IOS客户端 |
10楼2017-01-11 13:03:38