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rhapsody007

金虫 (小有名气)

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什么样的样本能提出这么小的DNA，确实这提的是DNA么

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吉恩特磁珠

11楼2017-01-11 14:45:13

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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)

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引用回帖:

11楼: Originally posted by rhapsody007 at 2017-01-11 14:45:13
什么样的样本能提出这么小的DNA，确实这提的是DNA么

猪肝浸膏，猪肝提取液，是经过加工的，核酸应该被破坏比较严重，大部分断裂了，我用试剂盒提取的，刚开始提取的没有任何条带，改了一些步骤才提取出这么点很小的条带

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哈哈

12楼2017-01-11 14:49:11

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415881168

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13楼2017-01-11 14:51:17

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lxf921227

金虫 (小有名气)

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减少引物用量然后做个梯度PCR确定最适的退火温度

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14楼2017-01-11 15:12:39

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像鱼一样飞吧

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

你好，我曾经也是遇到过这样的情况，也是153bp的条带，空白对照老是出现跟正常条带一样的条带产物。起初我以为是我操作的不规范造成的，但是事实上我请师兄师姐做也是这样的情况，然后我问老师他放大之后给我看我的条带是不是在一条直线上，放大之后发现果然不在一条直线上，所以我老师我做的没有问题。我表面上同意了他的观点，但是我一直在找原因，如果您解决了这个问题，可以跟我交流一下么？先谢谢您！另外，因为我们的片段很小，如果您和我一样用的是ex-tag酶的话，我建议您有条件的话可以用高保真pfu酶试验一下，因为据说ex-taq酶容易发生突变，具体我也不太清楚了，我的老师也不让我跟进这个试验了！