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Abrahamyang

新虫 (初入文坛)

[求助] 烟草基因组提取呈现胶冻状难溶物

根据经典CTAB法提取烟草叶片基因组DNA，加入异丙醇后出现白色絮状沉淀，用70%乙醇洗涤后吹干，用水或者TE溶解，均难以溶解，呈现胶冻状物质，也无法再次用裂解液溶解，该怎么解决？寻求帮助
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1楼 2017-01-10 23:40:36
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hanzegang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
Abrahamyang: 金币+5, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2017-01-12 14:17:49
引用回帖:
5楼: Originally posted by Abrahamyang at 2017-01-11 19:03:59
我用了TE过夜溶解都没能溶解掉它们，真是顽固啊它们...

重新用氯仿异戊醇抽提一遍试试，就是从加氯仿异戊醇开始把下面的步骤再进行一遍。最后TE多加点，50微升起。
另外，会不会是你磨样的时候，吸取上清的时候操作有问题，问问同实验室的其他人。
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6楼2017-01-11 19:17:01
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寒冰利剑

金虫 (小有名气)
建议提取DNA的样品不宜过多，用氯仿异戊醇抽提时不要吸到有机相，可以少吸一点上清，异丙醇用等体积低温沉降DNA，再试试。

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岂能尽如人意，但求无愧我心。
2楼2017-01-10 23:55:11
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Abrahamyang

新虫 (初入文坛)
试过了，还是没有办法解决这个问题，不过仍然感谢您
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3楼2017-01-11 08:36:01
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hanzegang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

样品量不要太多，氯仿异戊醇抽提两次，溶解的时候稍微加多一点水或TE，37度温浴溶解。
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4楼2017-01-11 18:35:04
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