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Abrahamyang

新虫 (初入文坛)

[求助] 烟草基因组提取呈现胶冻状难溶物

根据经典CTAB法提取烟草叶片基因组DNA,加入异丙醇后出现白色絮状沉淀,用70%乙醇洗涤后吹干,用水或者TE溶解,均难以溶解,呈现胶冻状物质,也无法再次用裂解液溶解,该怎么解决?寻求帮助
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hanzegang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
Abrahamyang: 金币+5, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2017-01-12 14:17:49
引用回帖:
5楼: Originally posted by Abrahamyang at 2017-01-11 19:03:59
我用了TE过夜溶解都没能溶解掉它们,真是顽固啊它们...

重新用氯仿异戊醇抽提一遍试试,就是从加氯仿异戊醇开始把下面的步骤再进行一遍。最后TE多加点,50微升起。
另外,会不会是你磨样的时候,吸取上清的时候操作有问题,问问同实验室的其他人。
6楼2017-01-11 19:17:01
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寒冰利剑

金虫 (小有名气)

建议提取DNA的样品不宜过多,用氯仿异戊醇抽提时不要吸到有机相,可以少吸一点上清,异丙醇用等体积低温沉降DNA,再试试。

发自小木虫Android客户端
岂能尽如人意,但求无愧我心。
2楼2017-01-10 23:55:11
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Abrahamyang

新虫 (初入文坛)

试过了,还是没有办法解决这个问题,不过仍然感谢您
3楼2017-01-11 08:36:01
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hanzegang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

样品量不要太多,氯仿异戊醇抽提两次,溶解的时候稍微加多一点水或TE,37度温浴溶解。
4楼2017-01-11 18:35:04
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