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Abrahamyang

新虫 (初入文坛)

[求助] 烟草基因组提取呈现胶冻状难溶物

根据经典CTAB法提取烟草叶片基因组DNA,加入异丙醇后出现白色絮状沉淀,用70%乙醇洗涤后吹干,用水或者TE溶解,均难以溶解,呈现胶冻状物质,也无法再次用裂解液溶解,该怎么解决?寻求帮助
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Abrahamyang

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by hanzegang at 2017-01-11 19:43:31
按道理来说,烟草的DNA很好提取,你的问题我也没有遇到过。说几点,自己认为可能的原因吧。
1) 尽量取幼嫩的烟草叶片,不要太多,1至2g就足够了;
2)磨样的时候尽量快,而且要磨彻底,用液氮磨样或者直接在EP管 ...

谢谢你的分析,我会仔细分析我的错误在哪里的!
10楼2017-01-12 09:21:50
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寒冰利剑

金虫 (小有名气)

建议提取DNA的样品不宜过多,用氯仿异戊醇抽提时不要吸到有机相,可以少吸一点上清,异丙醇用等体积低温沉降DNA,再试试。

发自小木虫Android客户端
岂能尽如人意,但求无愧我心。
2楼2017-01-10 23:55:11
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Abrahamyang

新虫 (初入文坛)

试过了,还是没有办法解决这个问题,不过仍然感谢您
3楼2017-01-11 08:36:01
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hanzegang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

样品量不要太多,氯仿异戊醇抽提两次,溶解的时候稍微加多一点水或TE,37度温浴溶解。
4楼2017-01-11 18:35:04
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