版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

返回列表

accumulate03

新虫 (著名写手)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 4022.6
散金: 711
红花: 14
沙发: 2
帖子: 1165
在线: 154.1小时
虫号: 3991004
注册: 2015-07-26
性别: MM
专业: 药物分析

[求助] nanodrop测蛋白（葡萄糖氧化酶）浓度求助已有4人参与

本人新手，实验室刚买回来一台nanodrop。想用它测葡萄糖氧化酶也就是蛋白质的浓度。但是仪器测蛋白A280，没有我测的程序。如果测的话，需要知道葡萄糖氧化酶的摩尔消光系数。

不知道有没有同学用过这种仪器，测过系统未设定蛋白的浓度？葡萄糖氧化酶的摩尔吸光系数如何找到？希望懂得同学给予帮助，谢谢啦。

发自小木虫Android客户端

回复此楼

» 猜你喜欢

1楼 2017-01-08 19:37:37

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yxncas-2012

木虫 (正式写手)

应助: 30 (小学生)
金币: 2052.2
散金: 15
红花: 4
帖子: 352
在线: 95小时
虫号: 2147898
注册: 2012-11-26
性别: GG
专业: 蛋白质组学

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-01-14 21:37:15

每种蛋白氨基酸组成不一样，导致其在UV280光吸收的值差异很大，有一个系数的。根据你自己的蛋白序列可以去搜索，找到这个系数。再通过你测的值去除。我遇到的蛋白，有些系数是2.5，那你测得数值2.5才约1mg的浓度，有些系数0.2，测得值为0.4的话，应该就有2mg的浓度了

赞一下(1人)

回复此楼

11楼2017-01-13 14:53:12

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

keke226

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 36 (小学生)
金币: 5322.2
散金: 95
红花: 9
帖子: 778
在线: 736.8小时
虫号: 2363805
注册: 2013-03-20
性别: GG
专业: 细胞生物学研究中的新方法

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-01-14 21:37:32

A280测浓度的前提是，首先你的蛋白纯度要高，其次溶剂中不能有干扰物质（可以百度）。然后你要知道你蛋白的序列。之后将序列复制到下面网址中就可以计算出蛋白0.1%的质量消光系数。在nanoDrop上要选择输入消光系数的测量模式（不要选1mg=1的模式），应该是要输入1%的质量消光系数（0.1%的数值乘以10就行），这样测出来才比较准。

赞一下(1人)

回复此楼

读书廿年倦写字，如今翻书不识志，若知眷书悔前程，无如渔樵未识时。三年担柴熟山性，三年苦网谙水汹，前程在心自倦舒，识志何用书中清。

12楼2017-01-14 20:38:54

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

keke226

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 36 (小学生)
金币: 5322.2
散金: 95
红花: 9
帖子: 778
在线: 736.8小时
虫号: 2363805
注册: 2013-03-20
性别: GG
专业: 细胞生物学研究中的新方法

引用回帖:

12楼: Originally posted by keke226 at 2017-01-14 20:38:54
A280测浓度的前提是，首先你的蛋白纯度要高，其次溶剂中不能有干扰物质（可以百度）。然后你要知道你蛋白的序列。之后将序列复制到下面网址中就可以计算出蛋白0.1%的质量消光系数。在nanoDrop上要选择输入消光系数的 ...

不好意思，忘了贴网址了
http://web.expasy.org/protparam/

赞一下(1人)

回复此楼

读书廿年倦写字，如今翻书不识志，若知眷书悔前程，无如渔樵未识时。三年担柴熟山性，三年苦网谙水汹，前程在心自倦舒，识志何用书中清。

13楼2017-01-14 21:11:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖