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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-01-14 21:37:15
每种蛋白氨基酸组成不一样,导致其在UV280光吸收的值差异很大,有一个系数的。根据你自己的蛋白序列可以去搜索,找到这个系数。再通过你测的值去除。我遇到的蛋白,有些系数是2.5,那你测得数值2.5才约1mg的浓度,有些系数0.2,测得值为0.4的话,应该就有2mg的浓度了
11楼2017-01-13 14:53:12
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-01-14 21:37:32
A280测浓度的前提是,首先你的蛋白纯度要高,其次溶剂中不能有干扰物质(可以百度)。然后你要知道你蛋白的序列。之后将序列复制到下面网址中就可以计算出蛋白0.1%的质量消光系数。在nanoDrop上要选择输入消光系数的测量模式(不要选1mg=1的模式),应该是要输入1%的质量消光系数(0.1%的数值乘以10就行),这样测出来才比较准。
读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
12楼2017-01-14 20:38:54
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by keke226 at 2017-01-14 20:38:54
A280测浓度的前提是,首先你的蛋白纯度要高,其次溶剂中不能有干扰物质(可以百度)。然后你要知道你蛋白的序列。之后将序列复制到下面网址中就可以计算出蛋白0.1%的质量消光系数。在nanoDrop上要选择输入消光系数的 ...

不好意思,忘了贴网址了
http://web.expasy.org/protparam/
读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
13楼2017-01-14 21:11:46
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heylixing

铁虫 (正式写手)

你看下A260/280的比值,在0.5-0.6之间。xi'ao

发自小木虫Android客户端
14楼2017-01-31 07:16:48
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heylixing

铁虫 (正式写手)

15楼2017-01-31 07:17:23
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BIOTITAN2009

金虫 (小有名气)

摩尔吸光系数可以在expasy中的ProtParam中得到,输入你的蛋白氨基酸序列,可以自动计算。网址: http://web.expasy.org/protparam/ ... 17573811.1485959499
Ignorance is infinite.
16楼2017-02-01 22:33:42
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