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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 各位大神，做Westen blot，条带特异性很差。。。什么原因呢？
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月明星系

新虫 (小有名气)

[求助] 各位大神，做Westen blot，条带特异性很差。。。什么原因呢？ 已有2人参与

各位大神，菜鸟新手。蛋白约53KD，转膜条件为湿转，110V，70min，用碱性磷酸酶染色。为什么出现这么多的条带。跪求解答。

各位大神，做Westen blot，条带特异性很差。。。什么原因呢？


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1楼 2017-01-07 13:38:54
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
碱性磷酸酶本来就没有特异性
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2楼2017-01-09 11:05:27
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star013

新虫 (知名作家)
我们可以做wb技术服务

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3楼2017-01-09 12:00:30
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ljf0814

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接染胶就是不特异的，想要特异性条带要在转好的膜上孵育抗体再显色。
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4楼2017-01-09 15:59:42
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月明星系

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-01-09 11:05:27
碱性磷酸酶本来就没有特异性

浮育过抗体的。

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5楼2017-01-09 17:34:43
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月明星系

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ljf0814 at 2017-01-09 15:59:42
直接染胶就是不特异的，想要特异性条带要在转好的膜上孵育抗体再显色。

就是浮育过抗体的，成这样。

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6楼2017-01-09 17:35:11
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ljf0814

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 月明星系 at 2017-01-09 17:35:11
就是浮育过抗体的，成这样。
...

那应该是你的一抗有问题，特异性差
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7楼2017-01-09 17:38:57
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月明星系

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ljf0814 at 2017-01-09 17:38:57
那应该是你的一抗有问题，特异性差...

用的his抗体。

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8楼2017-01-09 20:15:36
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蔡小蕾99

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-01-09 11:05:27
碱性磷酸酶本来就没有特异性

求问你们用之前会把他分装吗？有没有具体的浓度和溶解液？

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9楼2017-07-20 16:43:12
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