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月明星系

新虫 (小有名气)

[求助] 各位大神,做Westen blot,条带特异性很差。。。什么原因呢? 已有2人参与

各位大神,菜鸟新手。蛋白约53KD,转膜条件为湿转,110V,70min,用碱性磷酸酶染色。为什么出现这么多的条带。跪求解答。

各位大神,做Westen blot,条带特异性很差。。。什么原因呢?


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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
碱性磷酸酶本来就没有特异性
2楼2017-01-09 11:05:27
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star013

新虫 (知名作家)


3楼2017-01-09 12:00:30
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ljf0814

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
直接染胶就是不特异的,想要特异性条带要在转好的膜上孵育抗体再显色。
4楼2017-01-09 15:59:42
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月明星系

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-01-09 11:05:27
碱性磷酸酶本来就没有特异性

浮育过抗体的。

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5楼2017-01-09 17:34:43
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月明星系

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ljf0814 at 2017-01-09 15:59:42
直接染胶就是不特异的,想要特异性条带要在转好的膜上孵育抗体再显色。

就是浮育过抗体的,成这样。

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6楼2017-01-09 17:35:11
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ljf0814

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 月明星系 at 2017-01-09 17:35:11
就是浮育过抗体的,成这样。
...

那应该是你的一抗有问题,特异性差
7楼2017-01-09 17:38:57
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月明星系

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by ljf0814 at 2017-01-09 17:38:57
那应该是你的一抗有问题,特异性差...

用的his抗体。

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8楼2017-01-09 20:15:36
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蔡小蕾99

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-01-09 11:05:27
碱性磷酸酶本来就没有特异性

求问你们用之前会把他分装吗?有没有具体的浓度和溶解液?

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9楼2017-07-20 16:43:12
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