24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1520  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lp5ypeng

新虫 (初入文坛)

[求助] WB试验中,内源性蛋白能出条带,带tag的出不来条带 已有3人参与

最近在做WB,我在HEK-293T中转染带tag的目的质粒后,用提取的蛋白跑WB,
结果总是用特异性抗体的有条带,但是用anti-Tag的抗体没有条带,
被这个问题困住了两三个月了,实验也没法往下进行。
把详细操作步骤跟老板对过了,老板也觉得没问题,他也想不出问题出在哪里,要愁死了
有人遇到过这种情况吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没有表达吧,要么转染效率太低,要么表达效率太低
4楼2017-01-06 11:51:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

徐胜亚

新虫 (初入文坛)

我也是,而且我的特异性抗体杂带多,没办法判断结果啊

发自小木虫Android客户端
2楼2017-01-06 10:14:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KKHYYc

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也遇到过这种情况,我觉得只能把标签换一下位置,C端和N端都试试,可能是由于你的蛋白的某一端的结构将标签包裹,而不能暴露标签的结合位点造成的。
3楼2017-01-06 10:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

是不是houzahui构建载体的时候没有去掉终止密码子?

发自小木虫Android客户端
特别喜欢家门口开门的瞬间,宝宝那个高兴呀,蹦蹦跳跳,好不热闹!
5楼2017-01-30 21:50:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 图鉴212 2026-03-30 3/150 2026-03-31 00:31 by jp9609
[考研] 生物考研337分求调剂 +3 cgxin 2026-03-30 4/200 2026-03-30 23:00 by Evan_Liu
[考研] 抱歉 +4 田洪有 2026-03-30 4/200 2026-03-30 21:26 by mumin1990
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +18 Mr. Z 2026-03-25 19/950 2026-03-30 19:01 by Wang200018
[考研] 332求调剂 +6 @MZB382400 2026-03-28 6/300 2026-03-30 16:57 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +4 QiMing7 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:10 by 唐沐儿
[考研] 349求调剂 +6 李木子啊哈哈 2026-03-25 6/300 2026-03-29 12:47 by 无际的草原
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-29 3/150 2026-03-29 12:06 by longlotian
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 085600,材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
信息提示
请填处理意见