24小时热门版块排行榜    

查看: 1513  |  回复: 7

lp5ypeng

新虫 (初入文坛)

[求助] WB试验中,内源性蛋白能出条带,带tag的出不来条带 已有3人参与

最近在做WB,我在HEK-293T中转染带tag的目的质粒后,用提取的蛋白跑WB,
结果总是用特异性抗体的有条带,但是用anti-Tag的抗体没有条带,
被这个问题困住了两三个月了,实验也没法往下进行。
把详细操作步骤跟老板对过了,老板也觉得没问题,他也想不出问题出在哪里,要愁死了
有人遇到过这种情况吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

徐胜亚

新虫 (初入文坛)

我也是,而且我的特异性抗体杂带多,没办法判断结果啊

发自小木虫Android客户端
2楼2017-01-06 10:14:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KKHYYc

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也遇到过这种情况,我觉得只能把标签换一下位置,C端和N端都试试,可能是由于你的蛋白的某一端的结构将标签包裹,而不能暴露标签的结合位点造成的。
3楼2017-01-06 10:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没有表达吧,要么转染效率太低,要么表达效率太低
4楼2017-01-06 11:51:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

是不是houzahui构建载体的时候没有去掉终止密码子?

发自小木虫Android客户端
特别喜欢家门口开门的瞬间,宝宝那个高兴呀,蹦蹦跳跳,好不热闹!
5楼2017-01-30 21:50:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15198028797

新虫 (初入文坛)

我也是,ha tag始终做不出来

发自小木虫Android客户端
6楼2017-08-22 12:18:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cy20052411

新虫 (小有名气)

没表达,要么抗体有问题

发自小木虫Android客户端
7楼2017-10-12 17:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cheryl呀

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你什么tag,先确定能不能表达。。
8楼2017-10-19 03:29:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lp5ypeng 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
信息提示
请填处理意见