24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 5730  |  回复: 3

六维空想

新虫 (小有名气)

[求助] 关于在目的基因两端加酶切位点 已有1人参与

我的目的基因是连在pu57载体上的  两端有酶切位点  现在想把它从pu57上克隆下来并加上新的酶切位点   设计好引物后  经过pcr 连接t载体测序  发现两端还是以前的酶切位点  但是我的引物已经换了酶切位点的  为什么会这样啊  已经重复好几次 都是一样的结果

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
按理说你的思路是没有什么问题,如果你这种方法行不通。我有一个建议,你可以参考一下。你可以设计一对不加酶切位点的引物,用保真性比较好的酶,扩pcr,然后以pcr产物为模板,换用新的酶切位点的一对引物来扩。希望能够帮助你。
2楼2017-01-04 11:07:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

六维空想

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by peitaokong at 2017-01-04 11:07:18
按理说你的思路是没有什么问题,如果你这种方法行不通。我有一个建议,你可以参考一下。你可以设计一对不加酶切位点的引物,用保真性比较好的酶,扩pcr,然后以pcr产物为模板,换用新的酶切位点的一对引物来扩。希望 ...

我也准备这么做  引物已经在合成了  不知道这样行不行

发自小木虫Android客户端
3楼2017-01-04 12:40:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 六维空想 at 2017-01-04 12:40:13
我也准备这么做  引物已经在合成了  不知道这样行不行
...

能够扩出来,应该问题就不大。
4楼2017-01-04 12:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 六维空想 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 314求调剂 +11 1xiaojun23 2026-03-31 11/550 2026-04-02 10:12 by BruceLiu320
[考研] 377求调剂 +3 RASKIN 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:45 by zzchen2000
[考研] 367求调剂 +8 芋泥啵啵… 2026-03-28 8/400 2026-04-02 09:20 by olim
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-01 12/600 2026-04-02 09:15 by olim
[考研] 一志愿北京科技,085601总分305求调剂 +9 半生瓜! 2026-04-01 11/550 2026-04-02 08:28 by Wang200018
[考研] 085601一志愿中山大学深圳材料工程330求调剂 +7 pipiver 2026-03-30 7/350 2026-04-02 07:58 by 尚水阁主
[考研] 材料求调剂 +8 呢呢妮妮 2026-04-01 8/400 2026-04-02 07:13 by yjolah
[考研] 环境工程297分求调剂一志愿杭高院 +10 GENJIOW 2026-03-31 11/550 2026-04-01 21:38 by GENJIOW
[考研] 349求调剂 +6 吃的不少 2026-04-01 6/300 2026-04-01 17:55 by JYD2011
[考研] 0856,材料与化工321分求调剂 +13 大馋小子 2026-03-27 14/700 2026-04-01 15:58 by yanflower7133
[考研] 311求调剂 +10 李芷新1 2026-03-31 10/500 2026-04-01 14:38 by chenqifeng666
[考研] 070300化学专业279调剂 +10 哈哈哈^_^ 2026-03-31 10/500 2026-03-31 23:13 by liu823948201
[考研] 080200学硕,机械工程专业277分,求带走! +4 瓶子PZ 2026-03-31 4/200 2026-03-31 20:16 by vgtyfty
[考研] 合肥区域性重点一本招收调剂 +4 6266jl 2026-03-30 8/400 2026-03-31 18:43 by 6266jl
[考研] 本2一志愿C9-333分,材料科学与工程,求调剂 +9 升升不降 2026-03-31 9/450 2026-03-31 18:01 by 无际的草原
[考研] 254材料与化工求调剂 +3 翰冬林楠 2026-03-30 4/200 2026-03-31 17:53 by yishunmin
[考研] 物理学调剂 +4 小羊36 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:16 by lishahe
[考研] 生物考研337分求调剂 +4 cgxin 2026-03-30 6/300 2026-03-31 14:18 by 记事本2026
[考研] 一志愿食品科学与工程083200求调剂 +4 XQTJZ 2026-03-30 4/200 2026-03-31 04:10 by fmesaito
[考研] 数一英一271专硕(085401)求调剂,可跨 +7 前行必有光 2026-03-28 8/400 2026-03-28 23:22 by 小木虫tim
信息提示
请填处理意见