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请问三片段的overlap可以做吗
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shi6625893
金虫
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专业: 微生物生理与生物化学
[交流]
请问三片段的overlap可以做吗
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我有三片段分别为1100左右bp,939bp和1100左右bp,做重叠延伸,没成功,请问三片段的overlap可以做吗,还是要两片段两片段的做?有没有人做过,有什么经验?谢谢!
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1楼
2016-12-31 14:31:52
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小静儿000
新虫
(初入文坛)
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注册: 2016-08-01
专业: 生物信息学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可以用诺唯赞的同源重组试剂盒有一款是可以做多片段的,你的片段这么小肯定很好做,我的四个基因总共12k都做成功了,祝你好运
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6楼
2017-01-05 14:52:31
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草溪河
铁虫
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虫号: 1935935
注册: 2012-08-12
性别: GG
专业: 植物病理学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
两两做吧,或者用infusion吧
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2楼
2017-01-02 19:44:31
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junior850621
铁杆木虫
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帖子: 1044
在线: 512.5小时
虫号: 868883
注册: 2009-10-11
性别: GG
专业: 细胞信号转导
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以一起做,不行的话再分开做。
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3楼
2017-01-02 19:46:00
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yueyiweihan
新虫
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虫号: 3185922
注册: 2014-05-06
专业: 微生物生理与生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以算好比例,两两一起做,让两个片段的p mol(计算可以用公式ng*1000/650/碱基数)相同,做好两个后再和第三个算好接着做。比较简单的是用Gibson体系,可以直接把3个片段和载体一步连接好。
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4楼
2017-01-04 16:23:06
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