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shi6625893

金虫 (小有名气)

[交流] 请问三片段的overlap可以做吗已有6人参与

我有三片段分别为1100左右bp,939bp和1100左右bp,做重叠延伸,没成功,请问三片段的overlap可以做吗,还是要两片段两片段的做?有没有人做过,有什么经验?谢谢!
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草溪河

铁虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
两两做吧,或者用infusion吧

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2楼2017-01-02 19:44:31
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以一起做,不行的话再分开做。

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3楼2017-01-02 19:46:00
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yueyiweihan

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以算好比例,两两一起做,让两个片段的p mol(计算可以用公式ng*1000/650/碱基数)相同,做好两个后再和第三个算好接着做。比较简单的是用Gibson体系,可以直接把3个片段和载体一步连接好。
4楼2017-01-04 16:23:06
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C小杨

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以,再多几个都可以做
5楼2017-01-04 17:10:58
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小静儿000

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可以用诺唯赞的同源重组试剂盒有一款是可以做多片段的,你的片段这么小肯定很好做,我的四个基因总共12k都做成功了,祝你好运
6楼2017-01-05 14:52:31
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xiemin217

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以做,关键是退火,必须三个片段可以连在一起

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7楼2017-01-05 15:42:45
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