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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 原核表达融合His蛋白，考马斯可见条带，western检测不出啦
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匍匐前进

新虫 (初入文坛)

[求助] 原核表达融合His蛋白，考马斯可见条带，western检测不出啦 已有2人参与

用PET20-b,表达his融合蛋白，考马斯亮蓝可以看到表达条带，western检测HIS标签，却杂不出来，有什么指导经验吗
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1楼 2016-12-29 16:14:33
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wanghuan2017

新虫 (初入文坛)
请问楼主的问题现在解决了吗？我目前也遇到了这样的问题，考染有带（很粗），WB无带或为浅灰
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11楼2018-01-22 17:19:05
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bush119

木虫 (职业作家)

灌水高手

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
匍匐前进: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-12-30 13:49:03
做过纯化吗？
用镍柱纯化一下再砸
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pjxiongjing
2楼2016-12-29 16:44:54
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bush119

木虫 (职业作家)

灌水高手

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
匍匐前进: 金币+5, ★有帮助 2016-12-30 13:49:39
可能是western玩的不6 调整一下抗体浓度 别洗得太狠
转膜效果如何？
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3楼2016-12-29 16:45:47
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bush119

木虫 (职业作家)

灌水高手

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流，请尽量一次性回帖 2016-12-30 07:44:38
一般没有条带 问题都出在转膜上
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4楼2016-12-29 16:46:39
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