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蛋白纯化问题 已有2人参与
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最近在做蛋白纯化问题,一直纯化不出来,主要是目的蛋白都挂不上镊柱!需要说明的是,我是用AKTA仪器纯化的,镊柱是重新再生过的,别人一起纯化,他都可以纯化出来。 刚开始用PH7.4的A(20mM咪唑),B(500mM咪唑)液进行纯化,结果目的蛋白都没有挂上镊柱,后来换成PH8.0的A(不含咪唑),B(500mM咪唑)液还是挂不上镊柱,这倒是是怎么回事呀?求各位大神支招!不胜感激!!! PS:我的蛋白是真核蛋白,分子量17KDa,用28a载体在BL21DE3中进行可溶性表达,然后再去纯化 @biostar2009 发自小木虫Android客户端 |
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