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Reasky

新虫 (初入文坛)

[求助] 氯霉素抗性的质粒转到BL21里不长,怎么办? 已有1人参与

老板从国外带回来一个质粒,氯霉素抗性的。
我先用它转了DH5α,涂在氯霉素板上,长的很正常。
然后又用它转了BL21,就不长了,即使转几百纳克的质粒也不长。
转化的流程确定没错:冰浴30min,热击60s,冰浴2min,加LB培养基37℃复苏1小时,涂板。

BL21感受态也没问题,我从一管100μl的感受态里,各取一半作了不同的转化,一管做这个氯霉素抗性的,一管做氨苄抗性的,氨苄的那个就长的很正常。


试了几次了都这样,求解惑。。@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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jcstone1027

铁杆木虫 (正式写手)

木虫


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-24 21:17:29
我们也转化过氯霉素的,DH5a都不好长,Bl 21更加会困难,你看一下培养时间,延长一些会不会好一些。

发自小木虫IOS客户端
学习,交流
3楼2016-12-24 16:14:56
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Reasky

新虫 (初入文坛)

2楼2016-12-24 15:51:04
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Reasky

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jcstone1027 at 2016-12-24 16:14:56
我们也转化过氯霉素的,DH5a都不好长,Bl 21更加会困难,你看一下培养时间,延长一些会不会好一些。

谢谢哈。我每次尝试都已养了16个小时以上,还是没长出来

发自小木虫Android客户端
4楼2016-12-24 16:47:45
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阿门阿前1991

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个具体要看是什么质粒,并不是所有的都适合Bl 21。
总会出现一个温柔的人,让你变得温暖,然后默默离开。
5楼2016-12-26 08:58:30
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