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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 氯霉素抗性的质粒转到BL21里不长，怎么办？
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Reasky

新虫 (初入文坛)

[求助] 氯霉素抗性的质粒转到BL21里不长，怎么办？ 已有1人参与

老板从国外带回来一个质粒，氯霉素抗性的。
我先用它转了DH5α，涂在氯霉素板上，长的很正常。
然后又用它转了BL21，就不长了，即使转几百纳克的质粒也不长。
转化的流程确定没错：冰浴30min，热击60s，冰浴2min，加LB培养基37℃复苏1小时，涂板。

BL21感受态也没问题，我从一管100μl的感受态里，各取一半作了不同的转化，一管做这个氯霉素抗性的，一管做氨苄抗性的，氨苄的那个就长的很正常。


试了几次了都这样，求解惑。。@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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1楼 2016-12-24 14:12:02
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jcstone1027

铁杆木虫 (正式写手)

木虫
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-24 21:17:29
我们也转化过氯霉素的，DH5a都不好长，Bl 21更加会困难，你看一下培养时间，延长一些会不会好一些。

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学习，交流
3楼2016-12-24 16:14:56
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Reasky

新虫 (初入文坛)
有人么？

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2楼2016-12-24 15:51:04
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Reasky

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jcstone1027 at 2016-12-24 16:14:56
我们也转化过氯霉素的，DH5a都不好长，Bl 21更加会困难，你看一下培养时间，延长一些会不会好一些。

谢谢哈。我每次尝试都已养了16个小时以上，还是没长出来

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4楼2016-12-24 16:47:45
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阿门阿前1991

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个具体要看是什么质粒，并不是所有的都适合Bl 21。
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总会出现一个温柔的人，让你变得温暖，然后默默离开。
5楼2016-12-26 08:58:30
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