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Reasky新虫 (初入文坛)
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氯霉素抗性的质粒转到BL21里不长,怎么办? 已有1人参与
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老板从国外带回来一个质粒,氯霉素抗性的。 我先用它转了DH5α,涂在氯霉素板上,长的很正常。 然后又用它转了BL21,就不长了,即使转几百纳克的质粒也不长。 转化的流程确定没错:冰浴30min,热击60s,冰浴2min,加LB培养基37℃复苏1小时,涂板。 BL21感受态也没问题,我从一管100μl的感受态里,各取一半作了不同的转化,一管做这个氯霉素抗性的,一管做氨苄抗性的,氨苄的那个就长的很正常。 试了几次了都这样,求解惑。。@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw |
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Reasky
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我们也转化过氯霉素的,DH5a都不好长,Bl 21更加会困难,你看一下培养时间,延长一些会不会好一些。 发自小木虫IOS客户端 |

3楼2016-12-24 16:14:56
Reasky
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