应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 氯霉素抗性的质粒转到BL21里不长，怎么办？
61/1返回列表
查看: 2435  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Reasky

新虫 (初入文坛)

[求助] 氯霉素抗性的质粒转到BL21里不长，怎么办？ 已有1人参与

老板从国外带回来一个质粒，氯霉素抗性的。
我先用它转了DH5α，涂在氯霉素板上，长的很正常。
然后又用它转了BL21，就不长了，即使转几百纳克的质粒也不长。
转化的流程确定没错：冰浴30min，热击60s，冰浴2min，加LB培养基37℃复苏1小时，涂板。

BL21感受态也没问题，我从一管100μl的感受态里，各取一半作了不同的转化，一管做这个氯霉素抗性的，一管做氨苄抗性的，氨苄的那个就长的很正常。


试了几次了都这样，求解惑。。@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-12-24 14:12:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Reasky

新虫 (初入文坛)
有人么？

发自小木虫Android客户端
回复此楼
2楼2016-12-24 15:51:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jcstone1027

铁杆木虫 (正式写手)

木虫
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-24 21:17:29
我们也转化过氯霉素的，DH5a都不好长，Bl 21更加会困难，你看一下培养时间，延长一些会不会好一些。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
学习，交流
3楼2016-12-24 16:14:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Reasky

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jcstone1027 at 2016-12-24 16:14:56
我们也转化过氯霉素的，DH5a都不好长，Bl 21更加会困难，你看一下培养时间，延长一些会不会好一些。

谢谢哈。我每次尝试都已养了16个小时以上，还是没长出来

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-12-24 16:47:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿门阿前1991

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个具体要看是什么质粒，并不是所有的都适合Bl 21。
赞一下 回复此楼
总会出现一个温柔的人，让你变得温暖，然后默默离开。
5楼2016-12-26 08:58:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cuic_Qing

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 阿门阿前1991 at 2016-12-26 08:58:30
这个具体要看是什么质粒，并不是所有的都适合Bl 21。

请问这个怎么看呢 什么质粒适合BL21
赞一下 回复此楼
6楼2018-03-09 14:42:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Reasky 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +4 元夕元 2026-03-20 5/250 2026-03-25 00:20 by 元夕元
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 085600材料与化工调剂 +8 A-哆啦Z梦 2026-03-23 13/650 2026-03-24 21:05 by greychen00
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap－ 2026-03-22 9/450 2026-03-23 12:57 by yqdszhdap－
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 352求调剂 +3 大米饭！ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123！
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭