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卷哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by hanzegang at 2016-12-24 10:34:49
1.终止不终止,构载体的话影响不大。
2.双酶切体系的buffer应该就在你买的酶的袋子里,你再找好。
3.95度5min钟应该是变性,不是退火。加石蜡油是为了防止温度高,EP管里的PCR体系的液体会挥发,有盖子的话加盖子 ...

恩恩  好的  多谢大神  我看了双酶切的buffer,  买的两个酶里都带了tango缓冲液  ,还有一个是不一样的缓冲液,  那是不是就可以说明,  这两个酶可以共用这个双酶切反应液?
21楼2016-12-27 22:28:44
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卷哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by linglingys at 2016-12-23 08:55:51
引物退火没听说过用到95°C,变性倒是有

恩恩 好的
22楼2016-12-27 22:28:56
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卷哥

金虫 (小有名气)

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10楼: Originally posted by linglingys at 2016-12-23 09:08:46
具体什么影响没研究过,管子变形可能是你用管子质量不太好或者放位置不正

恩恩  谢谢大神  我估计是管子质量不好  因为我位置还是放在最中间 了
23楼2016-12-27 22:29:37
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卷哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-23 10:11:44
http://www.docin.com/p-586949133.html
这fermentas双酶切buffer图谱,你可以看一下。

哇哇  大神  您又来帮助我了  谢谢大神  我看看
24楼2016-12-27 22:30:19
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卷哥

金虫 (小有名气)

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13楼: Originally posted by hanzegang at 2016-12-24 10:31:12
没影响,EP管变形了是因为管子的质量不行,换进口的吧。...

恩恩 好的 谢谢大神
25楼2016-12-27 22:30:34
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小小鸟人

铜虫 (正式写手)

要要切克闹!煎饼果子来一套!!

发自小木虫Android客户端
天行健,君子以自强不息
26楼2016-12-27 22:33:53
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卷哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by ULYSSEESWB at 2016-12-26 15:55:43
感觉像穿越。。。
fermentas早被thermo收购了,快切酶都是通用buffer,另外不用终止反应
石蜡油更是上古传说了,那时pcr仪没有heated cover...

哈哈 不好意思 分子菜鸟让您见笑了  恩恩  我开了热盖的 开的105度  但是管子还是变形 里面东西还是挥发  我估计是管子质量不好  我今天切得时候按说明上的用65度水浴10min来终止了一下反应  切后如下图
请问大家用过fermentas的快切酶么 ?
IMG_1560.JPG

27楼2016-12-27 22:34:44
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卷哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
26楼: Originally posted by 小小鸟人 at 2016-12-27 22:33:53
要要切克闹!煎饼果子来一套!!

亲 你是来帮我热楼的  哈哈哈 谢谢
28楼2016-12-27 22:35:22
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卷哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by xl8284 at 2016-12-26 16:41:27
没必要终止酶切,直接跑胶切胶

恩恩  好的  谢谢大神
29楼2016-12-27 22:35:50
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hanzegang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
21楼: Originally posted by 卷哥 at 2016-12-27 22:28:44
恩恩  好的  多谢大神  我看了双酶切的buffer,  买的两个酶里都带了tango缓冲液  ,还有一个是不一样的缓冲液,  那是不是就可以说明,  这两个酶可以共用这个双酶切反应液?...

不知道你具体用的什么酶,你可以看看他们的说明书,或者去公司的官网上找找,应该会有详细的说明。
30楼2016-12-28 19:01:51
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