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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 请问大家用过fermentas的快切酶么 ？
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卷哥

金虫 (小有名气)
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14楼: Originally posted by hanzegang at 2016-12-24 10:34:49
1.终止不终止，构载体的话影响不大。
2.双酶切体系的buffer应该就在你买的酶的袋子里，你再找好。
3.95度5min钟应该是变性，不是退火。加石蜡油是为了防止温度高，EP管里的PCR体系的液体会挥发，有盖子的话加盖子 ...

恩恩  好的  多谢大神  我看了双酶切的buffer，  买的两个酶里都带了tango缓冲液  ，还有一个是不一样的缓冲液，  那是不是就可以说明，  这两个酶可以共用这个双酶切反应液？
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21楼2016-12-27 22:28:44
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卷哥

金虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by linglingys at 2016-12-23 08:55:51
引物退火没听说过用到95°C，变性倒是有

恩恩 好的
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22楼2016-12-27 22:28:56
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卷哥

金虫 (小有名气)
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10楼: Originally posted by linglingys at 2016-12-23 09:08:46
具体什么影响没研究过，管子变形可能是你用管子质量不太好或者放位置不正

恩恩  谢谢大神  我估计是管子质量不好  因为我位置还是放在最中间 了
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23楼2016-12-27 22:29:37
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卷哥

金虫 (小有名气)
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12楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-23 10:11:44
http://www.docin.com/p-586949133.html
这fermentas双酶切buffer图谱，你可以看一下。

哇哇  大神  您又来帮助我了  谢谢大神  我看看
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24楼2016-12-27 22:30:19
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卷哥

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by hanzegang at 2016-12-24 10:31:12
没影响，EP管变形了是因为管子的质量不行，换进口的吧。...

恩恩 好的 谢谢大神
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25楼2016-12-27 22:30:34
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小小鸟人

铜虫 (正式写手)
要要切克闹！煎饼果子来一套！！

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天行健，君子以自强不息
26楼2016-12-27 22:33:53
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卷哥

金虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by ULYSSEESWB at 2016-12-26 15:55:43
感觉像穿越。。。
fermentas早被thermo收购了，快切酶都是通用buffer，另外不用终止反应
石蜡油更是上古传说了，那时pcr仪没有heated cover...

哈哈 不好意思 分子菜鸟让您见笑了  恩恩  我开了热盖的 开的105度  但是管子还是变形 里面东西还是挥发  我估计是管子质量不好  我今天切得时候按说明上的用65度水浴10min来终止了一下反应  切后如下图
请问大家用过fermentas的快切酶么 ？
IMG_1560.JPG
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27楼2016-12-27 22:34:44
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卷哥

金虫 (小有名气)
引用回帖:
26楼: Originally posted by 小小鸟人 at 2016-12-27 22:33:53
要要切克闹！煎饼果子来一套！！

亲 你是来帮我热楼的  哈哈哈 谢谢
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28楼2016-12-27 22:35:22
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卷哥

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by xl8284 at 2016-12-26 16:41:27
没必要终止酶切，直接跑胶切胶

恩恩  好的  谢谢大神
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29楼2016-12-27 22:35:50
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hanzegang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 卷哥 at 2016-12-27 22:28:44
恩恩  好的  多谢大神  我看了双酶切的buffer，  买的两个酶里都带了tango缓冲液  ，还有一个是不一样的缓冲液，  那是不是就可以说明，  这两个酶可以共用这个双酶切反应液？...

不知道你具体用的什么酶，你可以看看他们的说明书，或者去公司的官网上找找，应该会有详细的说明。
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30楼2016-12-28 19:01:51
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