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凯瑟

新虫 (初入文坛)

[求助] SSR条带不清晰 已有1人参与

跑的是变性的聚丙烯酰胺的凝胶,最近总出现条带模糊的情况,实在找不到原因,寻求各位大神的帮助

SSR条带不清晰


SSR条带不清晰-1


SSR条带不清晰-2


@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 凯瑟 at 2016-12-27 23:46:09
点样孔挂胶,是拔梳子的时候没拔好吗?所有的操作步骤都和以前一样,以前成功的现在就是做不出来,再跑也是跑成下面这样,就是不成功,更奇怪的是以前用过的引物,现在再P,P不出条带,引物重新合成了,还是P不出来 ...

你这是什么电泳系统,薄厚多少,怎么会50V跑一夜,我们都是160V,180V跑两三个小时,胶厚度1mm,长度大概180*120。你如果只能过夜,效率太低了,我们一次两张版,加染色一天可以跑六张版,引物优化好的大小差距大,可以同一个板跑两个

关于你之前的问题看来不是挂胶的问题,肯定是电泳系统的问题,换了电泳槽,还不好再说吧

发自小木虫IOS客户端
18楼2017-01-02 20:05:41
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duane

至尊木虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-21 07:36:20
个人觉得是胶有问题,同样一块胶,同样的marker,跑出来的效果不一样(图3),而且胶两边的条带要比其他的都要清晰。

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2楼2016-12-21 07:09:21
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liugs

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2016-12-28 07:40:06
本帖内容被屏蔽

3楼2016-12-21 13:41:25
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凯瑟

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by duane at 2016-12-21 07:09:21
个人觉得是胶有问题,同样一块胶,同样的marker,跑出来的效果不一样(图3),而且胶两边的条带要比其他的都要清晰。

胶两边的清晰的是marker,pcr产物的条带都是模糊的

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4楼2016-12-23 07:47:07
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