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张小蛋

新虫 (小有名气)

[求助] 三个片段通过酶切连接方法连成线性片段 已有3人参与

有A,B,C三个片段,A片段720bp,含有sac1位点,C片段860bp,含有sal1位点,B片段3500bp两端含有sac1,sal1位点,通过酶切连接方式成线性片段,该怎么连呢?请大家答疑解惑~不胜感激~摩尔浓度比采用多大比较好,实际怎么操作呢?

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张小蛋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-16 16:24:48
Easygeno重组酶技术

嗯嗯,我们确实也在用重组酶,但是这个摩尔浓度比用1.:1:1怎么样?

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9楼2016-12-16 16:34:14
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查看全部 17 个回答

wuyuanqing

金虫 (正式写手)

2楼2016-12-15 20:27:35
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张小蛋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wuyuanqing at 2016-12-15 20:27:35
overlap pcr

这三个片段长度这么长,成功吗,可不可以推荐个用于长片段pcr的酶,谢谢啦

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3楼2016-12-15 21:36:25
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-16 07:39:34
设计引物可进行重叠PCR,酶的话最好用高保真的。

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知识就像蒲公英的花儿一样,播种在世界的每一个角落。
4楼2016-12-15 23:37:32
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