应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 高分子 » 功能高分子 » BSA蛋白吸附紫外测定方法就指教。
151/2返回列表12下一页
查看: 3104  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

110370210

铜虫 (著名写手)

[求助] BSA蛋白吸附紫外测定方法就指教。 已有2人参与

我想验证合成的高分子具有抗蛋白吸附作用，将BSA2mg/ml加到我的高分子溶液里，作用一段时间，离心出去沉淀，然后上清液测紫外。为什么有高分子的蛋白紫外吸收反而比单纯同浓度的BSA吸收还要高？不知道是离心的问题还是BSA问题。我测得是278nm的吸收。请问有人做过此实验吗？急求帮助。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2016-12-15 19:44:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
110370210: 金币+2 2016-12-16 08:40:28
你看看你用的高分子是不是有共轭基团，有比肽键更强的紫外吸收

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
提供GPC服务
2楼2016-12-15 23:58:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

110370210

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-12-15 23:58:18
你看看你用的高分子是不是有共轭基团，有比肽键更强的紫外吸收

浓度大的时候我测紫外确实有吸收峰，所以我把高分子浓度降到尽可能低，尽量让所以高分子都随BSA沉淀下去，这样测的时候紫外看不到我高分子吸收峰。不知道这样想对不对？还有BSA在PBS7.4,1mg/mL的吸光度在0.64左右，我看有的说应该在1。所以不知道是我BSA出问题了，还是其他操作的原因
赞一下 回复此楼
3楼2016-12-16 08:38:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

110370210

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-12-15 23:58:18
你看看你用的高分子是不是有共轭基团，有比肽键更强的紫外吸收

肽键吸收在230吧应该？那如果用考马斯亮蓝测590吸收是否可以避免呢？或者请问您有别的更好的办法吗？
赞一下 回复此楼
4楼2016-12-16 08:40:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 110370210 at 2016-12-16 08:40:12
肽键吸收在230吧应该？那如果用考马斯亮蓝测590吸收是否可以避免呢？或者请问您有别的更好的办法吗？...

肽键吸收应该在268吧，我不确定要查查看

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
提供GPC服务
5楼2016-12-16 08:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 110370210 at 2016-12-16 08:38:15
浓度大的时候我测紫外确实有吸收峰，所以我把高分子浓度降到尽可能低，尽量让所以高分子都随BSA沉淀下去，这样测的时候紫外看不到我高分子吸收峰。不知道这样想对不对？还有BSA在PBS7.4,1mg/mL的吸光度在0.64左右， ...

我不太明白你的实验设计，一般都是证有，你这个是证无。假设高分子对蛋白吸收有促进作用，应该是高分子本身在这个波长无吸收，蛋白有吸收，加入高分子之后，蛋白吸收信号变强了。如果是证无，原来蛋白有吸收，加入无吸收的高分子，蛋白紫外信号变弱了才对。我总觉得你的实验设计有点问题，为什么把蛋白往高分子里面加？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
提供GPC服务
6楼2016-12-16 09:03:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

110370210

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-12-16 09:03:18
我不太明白你的实验设计，一般都是证有，你这个是证无。假设高分子对蛋白吸收有促进作用，应该是高分子本身在这个波长无吸收，蛋白有吸收，加入高分子之后，蛋白吸收信号变强了。如果是证无，原来蛋白有吸收，加入 ...

不好意思，是我没说清楚。我的高分子含有PEG，想证明PEG抵抗蛋白吸附作用。将蛋白加到高分子溶液里，然后粒子，除去生成的高分子-BSA沉淀，然后测上清液紫外，吸光度越大说明我高分子抗吸附越好。另外作对照，一个不加PEG的高分子，还有一个单纯BSA的。现在问题是，我加上高分子后吸光度比单纯BSA还高，这就不合理了。
赞一下 回复此楼
7楼2016-12-16 09:43:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 110370210 at 2016-12-16 09:43:50
不好意思，是我没说清楚。我的高分子含有PEG，想证明PEG抵抗蛋白吸附作用。将蛋白加到高分子溶液里，然后粒子，除去生成的高分子-BSA沉淀，然后测上清液紫外，吸光度越大说明我高分子抗吸附越好。另外作对照，一个 ...

我确定PEG是没有紫外吸收的，你的高分子有没有不清楚，建议你从这方面考虑。也有可能你的PEG接枝率不够，没有达到你想要的效果

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
提供GPC服务
8楼2016-12-16 12:51:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

110370210

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-12-16 12:51:20
我确定PEG是没有紫外吸收的，你的高分子有没有不清楚，建议你从这方面考虑。也有可能你的PEG接枝率不够，没有达到你想要的效果
...

请问你测BSA浓度是怎么混匀的呢？我刚看到说不能剧烈震荡什么的，可能我操作没考虑这方面，也造成实验结果不理想。有没有什么好方法可以减少泡沫，又能混匀呢？
赞一下 回复此楼
9楼2016-12-16 14:00:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zwhua0502

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以试试荧光法

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-12-16 14:12:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 110370210 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 69/3450 2026-08-16 00:16 by mo_mo_mo_mo
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭