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110370210

铜虫 (著名写手)

[求助] BSA蛋白吸附紫外测定方法就指教。 已有2人参与

我想验证合成的高分子具有抗蛋白吸附作用,将BSA2mg/ml加到我的高分子溶液里,作用一段时间,离心出去沉淀,然后上清液测紫外。为什么有高分子的蛋白紫外吸收反而比单纯同浓度的BSA吸收还要高?不知道是离心的问题还是BSA问题。我测得是278nm的吸收。请问有人做过此实验吗?急求帮助。
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xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 110370210 at 2016-12-16 08:40:12
肽键吸收在230吧应该?那如果用考马斯亮蓝测590吸收是否可以避免呢?或者请问您有别的更好的办法吗?...

肽键吸收应该在268吧,我不确定要查查看

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5楼2016-12-16 08:59:16
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xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
110370210: 金币+2 2016-12-16 08:40:28
你看看你用的高分子是不是有共轭基团,有比肽键更强的紫外吸收

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2楼2016-12-15 23:58:18
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110370210

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-12-15 23:58:18
你看看你用的高分子是不是有共轭基团,有比肽键更强的紫外吸收

浓度大的时候我测紫外确实有吸收峰,所以我把高分子浓度降到尽可能低,尽量让所以高分子都随BSA沉淀下去,这样测的时候紫外看不到我高分子吸收峰。不知道这样想对不对?还有BSA在PBS7.4,1mg/mL的吸光度在0.64左右,我看有的说应该在1。所以不知道是我BSA出问题了,还是其他操作的原因
3楼2016-12-16 08:38:15
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110370210

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-12-15 23:58:18
你看看你用的高分子是不是有共轭基团,有比肽键更强的紫外吸收

肽键吸收在230吧应该?那如果用考马斯亮蓝测590吸收是否可以避免呢?或者请问您有别的更好的办法吗?
4楼2016-12-16 08:40:12
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