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铜虫 (著名写手)

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[求助] BSA蛋白吸附紫外测定方法就指教。已有2人参与

我想验证合成的高分子具有抗蛋白吸附作用，将BSA2mg/ml加到我的高分子溶液里，作用一段时间，离心出去沉淀，然后上清液测紫外。为什么有高分子的蛋白紫外吸收反而比单纯同浓度的BSA吸收还要高？不知道是离心的问题还是BSA问题。我测得是278nm的吸收。请问有人做过此实验吗？急求帮助。

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1楼 2016-12-15 19:44:48

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引用回帖:

6楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-12-16 09:03:18
我不太明白你的实验设计，一般都是证有，你这个是证无。假设高分子对蛋白吸收有促进作用，应该是高分子本身在这个波长无吸收，蛋白有吸收，加入高分子之后，蛋白吸收信号变强了。如果是证无，原来蛋白有吸收，加入 ...

不好意思，是我没说清楚。我的高分子含有PEG，想证明PEG抵抗蛋白吸附作用。将蛋白加到高分子溶液里，然后粒子，除去生成的高分子-BSA沉淀，然后测上清液紫外，吸光度越大说明我高分子抗吸附越好。另外作对照，一个不加PEG的高分子，还有一个单纯BSA的。现在问题是，我加上高分子后吸光度比单纯BSA还高，这就不合理了。