24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 774  |  回复: 7
当前主题已经存档。

ghx2005

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助:PCR扩增2000bp条带

目的基因比较长,不好扩增。试了几次都没有目的条带,做了bata-action有阳性结果,证明模板没问题。后来做了touch down PCR,隐约有目的条带,胶回收后以它为模版再做PCR,退火55度,还是没有目的条带。
怎么办?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


ghx2005(金币+1):谢谢参与
用好一点点酶,保证能做出来
很多时候是酶的扩增能力的问题而不是PCR体系的问题
2楼2008-12-08 16:01:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ningluztt

铜虫 (小有名气)

确定你的目的基因的GC 含量,GC含量高的话扩增就很困难,
3楼2008-12-08 17:25:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

synhily

木虫 (正式写手)

是啊 把你要扩的基因序列及引物发上来 帮你看看引物设计的咋样
4楼2008-12-08 18:32:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panghuili

金虫 (小有名气)

换酶 GC含量高的片段 用专门的酶
5楼2008-12-08 20:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gxsulong

至尊木虫 (著名写手)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
适当降低退火温度,适当延长延伸时间。还有要注意你的所有东西不要反复冻融。祝好运!
霉菌
6楼2008-12-08 21:40:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lipishun

金虫 (小有名气)

Takara的 LA,做RT-PCR?
建议用Invitrogen的反转试剂盒!
7楼2008-12-08 21:40:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lipishun

金虫 (小有名气)

Takara的 LA,做RT-PCR?
建议用Invitrogen的反转试剂盒!
8楼2008-12-08 21:42:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ghx2005 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +4 PolarBear11 2026-03-26 4/200 2026-03-26 23:32 by Linzejun
[考研] 349求调剂 +4 杰斯塔里斯 2026-03-21 4/200 2026-03-26 23:11 by 不吃魚的貓
[考研] 284求调剂 +9 junqihahaha 2026-03-26 10/500 2026-03-26 22:02 by 不吃魚的貓
[考研] 321求调剂 +5 材料cailiao 2026-03-21 5/250 2026-03-26 20:41 by fmesaito
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 20:33 by cy128
[考研] 求调剂 +8 Auroracx 2026-03-22 8/400 2026-03-26 19:55 by 不吃魚的貓
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 279 分 求调剂 +3 睡个好觉_16 2026-03-24 3/150 2026-03-26 15:43 by zzll406
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。,。,。,。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 308求调剂 +5 墨墨漠 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:19 by 544594351
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 各位老师您好:本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
信息提示
请填处理意见