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XuXuV_V

新虫 (初入文坛)

[交流] 菌液pcr跑胶图,求分析 已有5人参与

这是菌液pcr之后跑胶的照片,第一个是D2000marker,第二个孔是没有切过的质粒作对照,其余的是重组质粒,目的条带在100bp左右,怎么分析这个条带结果呢?

菌液pcr跑胶图,求分析


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xucb970

金虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
质粒很小,可能也被p了,第3,第8应该成功的

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宁坐板凳十年冷,不写文章半句空。
2楼2016-12-10 21:03:04
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XuXuV_V

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xucb970 at 2016-12-10 21:03:04
质粒很小,可能也被p了,第3,第8应该成功的

谢谢谢谢,但是我还有个问题,就是第5、6号的条带为什么是那样?是p到了其他什么吗?

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3楼2016-12-10 21:41:06
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xucb970

金虫 (小有名气)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-11 08:25:56
第四是你的目的条带,少量质粒条带,也是成功的。第五就是你的质粒,目的条带不是很明显,如果引物与质粒上的序列不配对,只是目的基因上的序列,理论上也是成功的,只是pcr没有扩出来,第六多了一条带,不清楚了,可能连了两条目的上去,可以测序。一点愚见。

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宁坐板凳十年冷,不写文章半句空。
4楼2016-12-10 23:01:20
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XuXuV_V

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xucb970 at 2016-12-10 23:01:20
第四是你的目的条带,少量质粒条带,也是成功的。第五就是你的质粒,目的条带不是很明显,如果引物与质粒上的序列不配对,只是目的基因上的序列,理论上也是成功的,只是pcr没有扩出来,第六多了一条带,不清楚了, ...

好的,非常感谢

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5楼2016-12-11 16:51:48
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寇美辰

新虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主你好,我想咨询一下你做的是微生物,那你提RNA一般用多少菌体呢
愿你不忘初心,唐不功捐~
6楼2016-12-14 09:21:55
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爱动脑的熊

新虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
能问下你的菌液pcr经验吗,我自己菌液pcr一直都不成功!

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7楼2018-01-05 11:35:28
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19890222

金虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 爱动脑的熊 at 2018-01-05 11:35:28
能问下你的菌液pcr经验吗,我自己菌液pcr一直都不成功!

菌液PCR不成功是你的菌壁太厚了吧,我做大肠菌液pcr都很好做的,直接用mix做就可以,梭菌革兰氏阳性菌做菌落菌液PCR也没什么问题,建议模板浓度降一下
不作死就不会死
8楼2018-01-05 12:29:44
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北京,北京

禁言 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
nono2009: 金币-20, 屏蔽内容, 违规存档, 禁止回帖广告 2018-01-06 17:31:11
本帖内容被屏蔽

9楼2018-01-06 11:57:40
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