PCR总是P不出来,什么原因 - 分子生物 - PCR相关 - 第5页小木虫论坛-学术科研互动平台

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Bioexperixgs

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模板稀释1000倍重新跑

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41楼2016-12-05 15:35:22

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智明寻找春娇

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37楼: Originally posted by 夜奴 at 2016-12-05 12:02:54
可是以前都p出来过，一样的体系，一样的模板，酶等是新的
...

所以可能是溶液里面不干净

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42楼2016-12-05 16:32:27

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Ailee桑卡娜

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第一张图那个有杂带是有污染吗？好像没做负对照？

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43楼2016-12-05 16:43:33

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Assistover

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感觉模板提的不好，蛋白污染了。建议重新提一到两个模板重新检查效果。

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44楼2016-12-05 16:49:07

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太阳的电子

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每次实验都要有阳性对照，没有的话做不出来你就哭吧！

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45楼2016-12-05 17:14:00

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夜奴

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44楼: Originally posted by Assistover at 2016-12-05 16:49:07
感觉模板提的不好，蛋白污染了。建议重新提一到两个模板重新检查效果。

嗯嗯，准备重新反转录RNA了

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46楼2016-12-05 23:33:12

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夜奴

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45楼: Originally posted by 太阳的电子 at 2016-12-05 17:14:00
每次实验都要有阳性对照，没有的话做不出来你就哭吧！

主要是已经摸索好条件了，之前也一次就能p出来，这次死活p不出来，而且偶尔又能p出20ul，超级纳闷，准备重新准备cDNA

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47楼2016-12-05 23:35:11

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夜奴

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43楼: Originally posted by Ailee桑卡娜 at 2016-12-05 16:43:33
第一张图那个有杂带是有污染吗？好像没做负对照？

没有对照，我还不知道怎么做对照有待学习，新手

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48楼2016-12-05 23:35:58

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夜奴

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42楼: Originally posted by 智明寻找春娇 at 2016-12-05 16:32:27
所以可能是溶液里面不干净
...

可能吧，最近用的有点杂，下次一定标记好用了哪几个，好找原因，第一次遇到现在这个现象

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49楼2016-12-05 23:38:35

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夜奴

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31楼: Originally posted by alicelchf at 2016-12-05 09:48:40
你能说一下你的浓度吗?你只说体积无法给你意见的

cDNA浓度吗？我也不知道，是用cDNA做模板的

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50楼2016-12-05 23:40:36

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