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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » Trizol提rna凝胶电泳条带分析
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ahjxhkq

新虫 (小有名气)

[求助] Trizol提rna凝胶电泳条带分析 已有4人参与

只看两张图的第一条泳道，求助各位大神，为什么会跑成这样啊，帮忙分析分析
还有，我提rna时，加氯仿离心后上层是褐色的，提了几次了都是这样，电泳条带就图上那样
准备明天去测个浓度看看

Trizol提rna凝胶电泳条带分析


Trizol提rna凝胶电泳条带分析-1


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1楼 2016-12-02 23:09:36
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ahjxhkq

新虫 (小有名气)
没人么。。

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2楼2016-12-03 12:30:42
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智明寻找春娇

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-12-03 22:33:13
1，在胶孔里面有大量的残留，应该是大分子物质比如蛋白质。
2，原理上，total RNA应该有3条带，分别应该是28S，10S和5.8S，但是你的胶上有明显的4条带，估计第一条应该是DNA。
综上应该是纯度不够，而且，提RNA是上层应该是无色。

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3楼2016-12-03 16:52:14
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草溪河

铁虫 (著名写手)
有些降解，注意操作和耗材

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4楼2016-12-03 20:57:37
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shx0743

新虫 (正式写手)
手提，还是试剂盒

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5楼2016-12-04 21:57:33
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shx0743

新虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-04 22:27:43
如果是手提，并且是植物材料的话，有可能是植物中酚类物质被氧化，导致褐色，加巯基乙醇就可以了！

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6楼2016-12-04 22:03:53
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wanshenghao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你在离心提取之前有没有把试剂混匀啊，有时候把它混匀就好了
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7楼2016-12-07 16:19:34
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ahjxhkq

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shx0743 at 2016-12-04 22:03:53
如果是手提，并且是植物材料的话，有可能是植物中酚类物质被氧化，导致褐色，加巯基乙醇就可以了！

试剂盒，Trizol

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8楼2016-12-10 09:59:12
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p君少年

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

加样孔里有杂质，可能是蛋白，加入氯仿后，吸上清液时要注意，不要带到中间的蛋白和基因组，从你的胶图看也还有一定的基因组残留，后面做逆转录时可以选用带DNA wiper的。
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9楼2016-12-28 14:52:32
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浮笙若梦

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by p君少年 at 2016-12-28 14:52:32
加样孔里有杂质，可能是蛋白，加入氯仿后，吸上清液时要注意，不要带到中间的蛋白和基因组，从你的胶图看也还有一定的基因组残留，后面做逆转录时可以选用带DNA wiper的。

诺唯赞有带gDNA wiper的，之前听他们技术的讲座说的，如果基因组不是污染特别严重，基本是百分比去除的。
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10楼2016-12-28 15:09:19
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