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铜虫 (小有名气)

[交流] 硫酸铵沉淀和疏水层析 已有2人参与

请问都说硫酸铵沉淀后的蛋白适宜直接上样疏水柱,可是该怎么确定样品的盐浓度和平衡缓冲液一致呢?还有就是关于硫酸铵沉淀的问题,我能不能用超滤管浓缩完蛋白后再用硫酸铵沉淀,这样就可以少用些硫酸铵了,因为发酵液体积太大了~

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铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 楠木dfe at 2016-11-25 10:10:46
浓缩后蛋白浓度会升,硫酸铵加下去容易沉淀出蛋白,不利于挂柱

就是要盐析然后复融呀,就是不确定复融后盐浓度多少,怎么保证和疏水的平衡缓冲液盐浓度一致~

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3楼2016-11-25 10:14:49
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楠木dfe

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
浓缩后蛋白浓度会升,硫酸铵加下去容易沉淀出蛋白,不利于挂柱

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2楼2016-11-25 10:10:46
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楠木dfe

新虫 (初入文坛)

4楼2016-11-25 11:13:18
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楠木dfe

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我做疏水时一般控制在电导130到170都可以挂柱

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5楼2016-11-25 11:14:24
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