| 查看: 1834 | 回复: 10 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
humants金虫 (正式写手)
|
[交流]
[求助] 溶菌酶破碎大肠杆菌
|
||
|
我打算做蛋白提取，以前单纯用超声效果不好，为了尽量保留活性，选择用溶菌酶见超声破碎的方法。 我按照分子克隆上的步骤： 1.菌体称重为0.4g，加PBS buffer 3ml （PH=8.05），充分混匀。 2.加现配的50mg/ml溶菌酶溶液240微升，至终浓度4mg/ml。冰水浴3小时。 3.超声400w，10s，10s，40次，结果目测还是乳白色，镜检很多菌体。 为什么破不开，搞不懂，我前几天做预实验的时候，还能变澄清？？？ 注：预实验的步骤与现在的一样，只是菌体重量是0.1g加PBS 3ml，再加溶菌酶至1mg/ml，超声400w，10s,10s, 20次。 麻烦大家能给以帮助，先谢谢了... 今天又做了一次，加完溶菌酶之后在4度中半小时，产生了乳白色絮状沉淀，还以为破碎好了呢，但是一超又变混了，1200rpm ，15min 离心之后沉淀发黄，和菌体差不多应该是没破开...？？？？ [ Last edited by humants on 2008-12-6 at 18:45 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
调剂求收留
已经有6人回复
-
化学308分求调剂
已经有5人回复
-
0703化学338求调剂！
已经有6人回复
-
286求调剂
已经有4人回复
-
求调剂推荐 材料 304
已经有3人回复
-
336材料求调剂
已经有7人回复
-
材料学硕333求调剂
已经有6人回复
-
一志愿郑州大学，080500学硕，总分317分求调剂
已经有5人回复
-
351求调剂
已经有3人回复
-
316求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
wusongabel
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 196.5
- 帖子: 50
- 在线: 4.2小时
- 虫号: 284793
- 注册: 2006-10-14
- 性别: GG
- 专业: 生物医用高分子材料
6楼2008-12-05 10:01:02
humants
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 603.8
- 散金: 1
- 帖子: 609
- 在线: 6.9小时
- 虫号: 532996
- 注册: 2008-03-25
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
3楼2008-12-04 18:51:36
hxsj
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.085
- 金币: 6684.2
- 红花: 9
- 帖子: 497
- 在线: 289.1小时
- 虫号: 641260
- 注册: 2008-10-30
- 性别: GG
- 专业: 光谱分析
4楼2008-12-04 23:26:51
humants
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 603.8
- 散金: 1
- 帖子: 609
- 在线: 6.9小时
- 虫号: 532996
- 注册: 2008-03-25
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
5楼2008-12-05 08:17:07
