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经过BCA定量后，WB时内参依然不齐，而且异常诡异 已有3人参与
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小弟刚开始做WB实验 具体步骤如下 首先样品是前面师兄冻存在负八十里的， 分 正常组，模型组，给药组 三组动物组织 每次蛋白分装定量取20微克组织+200微升 RIPA+PMSF 剪刀尽量剪碎后超声，冰上15min后离心，紧接着BCA定量 分装时每管20微升的体系 蛋白量30~60微克，其余用LB和pbs补齐 所有操作都是尽可能的低温 离心管离心机提前预冷 下面是重点 所有的内参tubulin 全部都是 加药组深 模型组其次 正常组最浅 提了三次蛋白了 做了8块胶了 几乎都是一毛一样的趋势 就不发多张图了  虽然tubulin这么不齐 但是目的蛋白齐啊 本该是给药组最深的目的蛋白 在正常组tubulin非常浅的情况下 硬生生的和目的 蛋白一个水平了  另外一个目的蛋白正常组也没表现出和tubulin相似的 该有的少量  各位大神帮忙看看 小弟现在真是不知道怎么办了 |
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博古书生
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