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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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S0715024

金虫 (小有名气)

[交流] 求助多糖脱蛋白时,遇到的奇怪问题

我遇到一个很奇怪的问题,我在做多糖脱蛋白的时候,加入三氯乙酸后没有沉淀生成,静置过夜,发现有一点点的白色絮状物,中和后,稍微加热,就有不少的絮状物生成,离心,上清液紫外扫描,发现没有蛋白吸收,我感到很奇怪。一般都是加入的过程中就有大量沉淀生成,为什么我是在加热的过程中,才有白色絮状物生成呢?请大家帮忙解释一下。
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S0715024

金虫 (小有名气)

为什么没有人回答我的问题啊?希望大家帮我解释一下啊!
2楼2008-12-04 09:00:27
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suly13

金虫 (小有名气)

佐龙佑虎双花大红棍


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 8-31 22:16
引用回帖:
Originally posted by S0715024 at 2008-12-3 17:00:
我遇到一个很奇怪的问题,我在做多糖脱蛋白的时候,加入三氯乙酸后没有沉淀生成,静置过夜,发现有一点点的白色絮状物,中和后,稍微加热,就有不少的絮状物生成,离心,上清液紫外扫描,发现没有蛋白吸收,我感到 ...

三氯乙酸脱蛋白的工艺也需要加热的,楼主说的现象可能与蛋白的性质、溶液的pH值有关系,具体我也解释不清楚。

但是建议楼主,三氯乙酸为有毒物质,现在应用已经逐渐被淘汰了,现在脱蛋白用的较多的是δ-葡萄糖内酯,这种物质是食品级的辅料,而且加入的量很小,除蛋白效果也不错,楼主可以查阅一下文献。
鼠标一点一击,一本好书上架了,嚎~ 鼠标再一点一击,这本好书归你了,嚎~ 人这一辈子最最高兴的事就是好资源大家一起分享! 人这一辈子最最最高兴的事就是分享
3楼2008-12-04 10:01:13
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jennyjing4

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
三氯乙酸确实不好,多糖损失大,还是用别的方法吧
人生就像一场旅行,在乎的不是目的地,而是旅途的风景、还有看风景的心情!
4楼2009-08-31 17:42:09
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miffyyhy

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 9-1 00:35
楼主可能是配三氯乙酸时浓度配低了,说不定就是这个偶然的失误的,因为我最近测酶活时也用的这个,也遇到过相似问题,最后查原因时就是因为TCA的浓度问题啊~~仅供参考哈
缘来缘去,一切随心,随性~~
5楼2009-08-31 22:20:58
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zhbhhero

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
三氯乙酸浓度可能太低,一加热蛋白变性沉淀。你的原料是什么,中和后会不会产生其他沉淀物质!
6楼2009-08-31 22:44:35
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Eileen1984

金虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 9-2 23:06
三氯乙酸除的是游离蛋白,如果蛋白和多糖结合在一起,就要用酶法,我平时除蛋白都是起先沉淀出现了,但是沉不下去,就放到冰箱中去静置2天,就能比较好的沉淀下来,再离心,楼主出现的问题我没遇到过,但是按理来说加热的话三氯乙酸会分解的,现在很多文献用树脂法脱蛋白,我们实验室用的是大孔吸附树脂,你可以尝试下
7楼2009-09-02 14:54:05
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