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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 求助多糖脱蛋白时，遇到的奇怪问题
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S0715024

金虫 (小有名气)

[交流] 求助多糖脱蛋白时，遇到的奇怪问题

我遇到一个很奇怪的问题，我在做多糖脱蛋白的时候，加入三氯乙酸后没有沉淀生成，静置过夜，发现有一点点的白色絮状物，中和后，稍微加热，就有不少的絮状物生成，离心，上清液紫外扫描，发现没有蛋白吸收，我感到很奇怪。一般都是加入的过程中就有大量沉淀生成，为什么我是在加热的过程中，才有白色絮状物生成呢？请大家帮忙解释一下。
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1楼 2008-12-03 17:00:14
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S0715024

金虫 (小有名气)
为什么没有人回答我的问题啊？希望大家帮我解释一下啊！
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2楼2008-12-04 09:00:27
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suly13

金虫 (小有名气)

佐龙佑虎双花大红棍
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 8-31 22:16
引用回帖:
Originally posted by S0715024 at 2008-12-3 17:00:
我遇到一个很奇怪的问题，我在做多糖脱蛋白的时候，加入三氯乙酸后没有沉淀生成，静置过夜，发现有一点点的白色絮状物，中和后，稍微加热，就有不少的絮状物生成，离心，上清液紫外扫描，发现没有蛋白吸收，我感到 ...

三氯乙酸脱蛋白的工艺也需要加热的，楼主说的现象可能与蛋白的性质、溶液的pH值有关系，具体我也解释不清楚。

但是建议楼主，三氯乙酸为有毒物质，现在应用已经逐渐被淘汰了，现在脱蛋白用的较多的是δ-葡萄糖内酯，这种物质是食品级的辅料，而且加入的量很小，除蛋白效果也不错，楼主可以查阅一下文献。
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鼠标一点一击，一本好书上架了，嚎~ 鼠标再一点一击，这本好书归你了，嚎~ 人这一辈子最最高兴的事就是好资源大家一起分享！ 人这一辈子最最最高兴的事就是分享
3楼2008-12-04 10:01:13
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jennyjing4

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
三氯乙酸确实不好，多糖损失大，还是用别的方法吧
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人生就像一场旅行，在乎的不是目的地，而是旅途的风景、还有看风景的心情！
4楼2009-08-31 17:42:09
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miffyyhy

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 9-1 00:35
楼主可能是配三氯乙酸时浓度配低了，说不定就是这个偶然的失误的，因为我最近测酶活时也用的这个，也遇到过相似问题，最后查原因时就是因为TCA的浓度问题啊~~仅供参考哈
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缘来缘去，一切随心，随性~~
5楼2009-08-31 22:20:58
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zhbhhero

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
三氯乙酸浓度可能太低，一加热蛋白变性沉淀。你的原料是什么，中和后会不会产生其他沉淀物质！
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6楼2009-08-31 22:44:35
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Eileen1984

金虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 9-2 23:06
三氯乙酸除的是游离蛋白，如果蛋白和多糖结合在一起，就要用酶法，我平时除蛋白都是起先沉淀出现了，但是沉不下去，就放到冰箱中去静置2天，就能比较好的沉淀下来，再离心，楼主出现的问题我没遇到过，但是按理来说加热的话三氯乙酸会分解的，现在很多文献用树脂法脱蛋白，我们实验室用的是大孔吸附树脂，你可以尝试下
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7楼2009-09-02 14:54:05
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