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MIDNA

铁虫 (小有名气)

[求助] 重组子转化大肠杆菌转化问题 已有1人参与

重组子转化大肠杆菌感受态,菌液pcr以后条带不明显,需不需要测序?求各位师兄师姐指教!
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默默搜寻
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痞子无敌

金虫 (正式写手)

先提质粒,后以质粒为模板p,条带大小一致后测序

发自小木虫IOS客户端
当你当你的眼睛眯着笑
2楼2016-11-21 20:50:12
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
条带不明显,看着有但又没有的感觉,应该不对,我们之前遇到过,酶切测序不对都不对,现在这种点都不挑了

发自小木虫Android客户端
···
3楼2016-11-21 23:07:38
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MIDNA

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小冀- at 2016-11-21 23:07:38
条带不明显,看着有但又没有的感觉,应该不对,我们之前遇到过,酶切测序不对都不对,现在这种点都不挑了

好吧!那我现在菌液pcr出现条带了,我还需要测序吗?
默默搜寻
4楼2016-11-27 08:55:06
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
4楼: Originally posted by MIDNA at 2016-11-27 08:55:06
好吧!那我现在菌液pcr出现条带了,我还需要测序吗?...

如果要做蛋白表达的话最好测一下,排除突变的可能
···
5楼2016-11-27 12:35:53
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

pcr验证不是很靠谱,容易出出现假阳性。双酶切验证比较准一点。你直接诱导表达看有没有目的条带不就ok了么。有明显目的条带的话测序都可以省了。
6楼2016-11-27 15:01:59
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